骨質評価に関連するmicroRNAの同定

インプラントを長期的に維持・安定させるためには、オッセオインテグレーションの獲得、維持が重要となる。オッセオインテグレーションには骨量や骨密度が関与していることが知られているが、近年特に骨質の重要性が注目されている。骨質についての研究は広く行われており、コラーゲンの架橋構造や機械的刺激の関与が報告されているが、その全ての分子機序が解明されているとはいえない。一方で、エピジェネティクス機構の一つであるmicroRNA(miRNA)の遺伝子発現調節は様々な生命現象に関与しており、骨組織においても骨リモデリング、発生等に関連している。本研究では、miRNAが骨質へ影響を与えるシグナル分子の一つであることを検証し、骨質評価の指標または薬剤標的としてのmiRNAの可能性を探ることを目的としている。本年度は、まず、前年度同様、過去の文献でlysyl oxidase(LOX)に影響を与えると報告のあるβ-AminopropionitrileおよびDL-Homocysteineを各濃度溶液に調整した。LOXはコラーゲン線維の架橋を促進することが報告されており骨質に影響する可能性がある。次に、骨芽細胞様細胞(MC3T3-E1)を6 well dishに1.0×10^5播種し、培地にて24時間培養し、これに各濃度の溶液を加え更に培養を行った。これよりTotal RNAを抽出し、骨分化に関連する遺伝子発現の変化を検討している。その際に顕微鏡の高倍率にて細胞形態の確認も行った。今後の予備実験としてMC3T3－E1へオッセオインテグレーションに関与すると考えられるmiRNA mimicをトランスフェクションし、その影響を確認した。

インプラントを長期的に維持・安定させるためには、オッセオインテグレーションの獲得、維持が重要となる。オッセオインテグレーションには骨量や骨密度が関与していることが知られているが、近年特に骨質の重要性が注目されている。骨質についての研究は広く行われており、コラーゲンの架橋構造や機械的刺激の関与が報告されているが、その全ての分子機序が解明されているとはいえない。一方で、エピジェネティクス機構の一つであるmicroRNA(miRNA)の遺伝子発現調節は様々な生命現象に関与しており、骨組織においても骨リモデリング、発生等に関連している。本研究では、miRNAが骨質へ影響を与えるシグナル分子の一つであることを検証し、骨質評価の指標または薬剤標的としてのmiRNAの可能性を探ることを目的としている。本年度は、まず、前年度同様、過去の文献でlysyl oxidase(LOX)に影響を与えると報告のあるβ-AminopropionitrileおよびDL-Homocysteineを各濃度溶液に調整した。LOXはコラーゲン線維の架橋を促進することが報告されており骨質に影響する可能性がある。次に、骨芽細胞様細胞(MC3T3-E1)を6 well dishに1.0×10^5播種し、培地にて24時間培養し、これに各濃度の溶液を加え更に培養を行った。これよりTotal RNAを抽出し、骨分化に関連する遺伝子発現の変化を検討している。その際に顕微鏡の高倍率にて細胞形態の確認も行った。今後の予備実験としてMC3T3－E1へオッセオインテグレーションに関与すると考えられるmiRNA mimicをトランスフェクションし、その影響を確認した。