Establishment of tick experimental systems to accelerate research on tick-borne infectious diseases

建立蜱实验体系，加速蜱传传染病研究

• 批准号: 20KK0151
• 负责人: 中尾 亮
• 金额: $ 12.06万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-10-27 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20KK0151/
• 关键词: 共生微生物; 人工吸血; マイクロビオーム; マダニ; マダニ細胞; 細胞

世界的に広く用いられているマダニ細胞（ISE18やIRE/CTVM19など）では、核型解析により染色体の異数性が観察されている。そこで、染色体数の異常を人工的に誘因することで、マダニ細胞の高増殖化を目的に試験を行った。フタトゲチマダニ（高知株・単為生殖系統）、キチマダニ（野外株）、ヤマアラシチマダニ（野外株）をウサギ吸血試験に供し、飽血マダニ個体を回収した。マダニ発育卵を材料に乳剤を作製し、培養開始時点に染色体分裂阻害物質を培地に添加し、培養を開始した。経時的に培地交換を行い、培養を維持している。マダニ人工吸血システムの構築のため、シリコン膜、吸血ユニットの改良を行った。さらに、過去に文献報告のある複数の化学物質（0-ニトロフェノール、サリチル酸メチル等）の吸血誘引物質としての有用性を検証した。その結果、75マイクロメートル厚のシリコン膜を用いた際に、マダニの膜への吸着が最も多く観察された。吸血誘引物質を添加する試験においては、マダニ吸血における有意な差はみられなかった。また、動物（ウシ、イノシシ、ヒグマ）の皮膚材料から、有機溶媒（ヘキサン、酢酸エチル、メタノール）および水を用いて抽出液を回収した。オルファクトメーターによるマダニ誘引試験を行ったが、いずれの抽出物もマダニ誘引活性は観察されなかった。これら一連の吸血試験は、合計9種の異なるマダニ種を用いて行った。人工吸血試験に用いるマダニ種により、吸着率に差がみられたことから、マダニ種ごとに最適な吸血条件が異なることが予想された。

在全球广泛使用的壁虱细胞中（例如ISE18和IRE/CTVM19），已经通过核分型观察到了染色体非整倍性。因此，进行了测试，以通过人为地诱导染色体数量的异常来增加壁虱细胞的增殖。裂开的tick虫（高知菌株，骨phen骨生成），sl裂（现场菌株）和豪猪s虫（现场菌株）接受了兔子血液吮吸测试，并收集了tick虫的个体。使用滴答鸡蛋作为材料制备乳液，在培养开始时，将染色体有丝分裂抑制剂添加到培养基中，并开始培养。随着时间的流逝，通过改变培养基来维持文化。为了构建tick人造血液吸血系统，硅膜和吸血单元得到了改善。此外，以前报道的几种化学物质（0-硝基苯酚，水杨酸甲酯等）的有用性被证实为吸血剂。结果，当使用了厚度为75微米的硅膜时，观察到最常见的刻度吸附在膜上。在添加吸血吸引剂的测试中，在滴答血液吸血中没有发现显着差异。还使用有机溶剂（己烷，乙酸乙酯，甲醇）和水从动物（牛，野猪，棕熊）的皮肤材料中收集提取物。使用嗅觉仪进行了吸引的测试，但在任何提取物中均未观察到吸引滴答的吸引活动。这些一系列的血液吮吸测试是使用总共九种不同的壁虱物种进行的。在人造血液吮吸测试中使用的壁虱物种之间观察到吸附率，并且可以预测，每个壁虱物种的最佳吸血条件会有所不同。

项目成果

人工膜を用いたマダニ吸血試験の試み

利用人工膜进行蜱吸血试验的尝试

• 发表时间: 2022
• 作者: 馬場佐織;草木迫浩大;田谷友里恵;林田京子;野中成晃;中尾亮
• 通讯作者: 中尾亮

ベルリン自由大学(ドイツ)

柏林自由大学（德国）

Exploring the eukaryotic microbiome in ticks

探索蜱虫中的真核微生物组

• 发表时间: 2022
• 作者: Yurie Taya;Gohta Kinoshita;Wessam Mohamed Ahmed Mohamed; Mohamed Abdallah Mohamed Moustafa;Yuma Ohari;Keita Ohari;Nariaki Nonaka;Ryo Nakao
• 通讯作者: Ryo Nakao

マダニのミトゲノム情報基盤構築とマダニ細胞樹立の試み

蜱线粒体基因组信息基础设施建设及蜱细胞建立尝试

• 发表时间: 2022
• 作者: Mohamed Wessam Mohamed Ahmed;Ali Alsagher O.;Mahmoud Hassan Y. A. H.;Omar Mosaab A.;Chatanga Elisha;Salim Bashir;Naguib Doaa;Anders Jason L.;Nonaka Nariaki;Moustafa Mohamed Abdallah Mohamed;Nakao Ryo;中尾亮
• 通讯作者: 中尾亮

Genotyping of Theileria parva populations in vaccinated and non-vaccinated cattle in Malawi

• DOI: 10.1017/s0031182022000464
• 发表时间: 2022-04-11
• 期刊: PARASITOLOGY
• 影响因子: 2.4
• 作者: Chatanga，Elisha;Ohari，Yuma;Nakao，Ryo
• 通讯作者: Nakao，Ryo