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Anti-tick vaccines targeting tick symbionts

针对蜱共生体的抗蜱疫苗

基本信息

批准号：
22KF0005
负责人：
中尾亮
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KF0005/
关键词：
コクシエラ様共生菌マイクロビオームビタミンB マダニ RNAseq ワクチン

项目摘要

本邦において優占するチマダニ属マダニにおいて、多くの種が保有することが知られているコクシエラ様共生菌について、引き続き解析を進めた。まず、昨年度のRNAseq解析により見出された複数のワクチン候補遺伝子（SufB遺伝子：鉄・硫黄クラスターの形成等にかかわる遺伝子等）について解析を進めた。フタトゲチマダニ実験室維持株を用いてウサギを用いた吸血試験に供し、吸血前および吸血後のマダニを回収した。マダニを解剖し、各臓器からトータルRNAを抽出し、ターゲット遺伝子を特異的に増幅するRT-PCR系によりその発現動態を測定した。しかしながら、RNAseq解析の結果とは異なり、ターゲットとした遺伝子の有意な発現は確認できなかった。この結果は、マダニの各臓器から取得したRNAseqデータを統合してin silico解析に用いたことにより、中腸等に存在する他の細菌群の発現遺伝子の影響を受け、低発現のコクシエラ様共生菌由来遺伝子が高発現遺伝子として誤って検出された可能性が示唆された。そこで、フタトゲチマダニの臓器別に取得したRNAseqデータを用いて再解析を行い、ワクチン候補遺伝子の再検討を行った。すなわち、コクシエラ様共生菌が主に局在することが報告されているマルピーギ管および卵巣由来の発現データを用い、アセンブリ、機能予測を行った。次に、吸血後に発現上昇が見られる遺伝子、吸血状態に関わらず高発現する遺伝子、ビタミン代謝に関わる高発現遺伝子の３つの指標に絞り、各項目で10遺伝子を上限にワクチン候補遺伝子として抽出した。ビオチン(ビタミンB7)の生合成に関わる遺伝子等が候補として検出された。

The analysis of symbiotic bacteria in this country has been carried out. The analysis of RNAseq in the past year shows that there are multiple candidate genes (SufB genes: iron, sulfur, etc.) The first step is to maintain the quality of the product. Dissection, RNA extraction, PCR amplification The results of RNAseq analysis are different, and the intentional occurrence of RNAseq is confirmed. The results showed that the presence of different organisms in the middle and middle intestine of the organism was affected by the presence of other bacterial species, and the possibility of low occurrence of symbiotic species and high occurrence of symbiotic species was discussed. In Tokyo, the RNAseq data obtained from the Fattagochi Madani device is being analyzed and re-analyzed, and the re-evaluation of Wakun candidate genes is being carried out. The results show that: (1) the number of bacteria in the plant is higher than that in the control plant;(2) the number of bacteria in the plant is higher than that in the control plant;(3) the number of bacteria in the plant is higher than that in the control plant;(4) the number of bacteria in the plant is higher than that in the control plant;(5) the number of bacteria in the plant is higher than that in the control plant; and (6) the number of bacteria in the plant is higher than that in the control plant. 3 indicators of high level of occurrence of the gene, metabolism, and the upper limit of 10 genes for each item. A candidate for the production of a new product (B7).