Nobel RNA modification in bacteria and its pathophysiological significance

细菌中Nobel RNA修饰及其病理生理意义

• 批准号: 21H02731
• 负责人: 富澤 一仁
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02731/
• 关键词: RNA修飾; 細菌感染; 修飾ヌクレオシド; 細菌; 修飾核酸; 形質転換; 感染

本研究では、1. 高次構造を有さないヌクレオシドを修飾する酵素は実在するのか？その酵素は何か？　2. 細菌における新規ヌクレオシドの修飾の意義は何か？　3 新規修飾ヌクレオシドが生理活性物質として機能するか？もし機能するなら受容体は何か？という問いに答える研究を実施している。今年度は、昨年度同定したm3A受容体の組織発現ならびに細胞内発現を定量PCR法ならびにウエスタンブロット法で同定した。その結果、胸腺やマクロファージなどの免疫組織や細胞、さらに腎臓に多く分布していることが分かった。腎臓での分布について、詳細な解析を行った結果、尿細管に多く分布していることが明らかになった。そこで、m3A受容体を多く発現しているヒト単球由来M1およびM2マクロファージを培養し、1 nMから1 microMの濃度でm3Aで処理した。処理1時間後にRNAを回収し、 インターロイキンの発現についてqPCR法で検討した。その結果、m3Aは濃度依存的にインターロイキンの発現を促進することが明らかになった。さらにm3Aが細胞増殖やアポトーシスならびに細胞移動などには影響を及ぼすかWST-1アッセイ、TUNEL染色ならびに細胞遊走アッセイで検討した。その結果、m3Aは、細胞増殖やアポトーシスならびに細胞移動には影響を及ぼさないことが明らかになった。以上の結果より、m3Aはm3A受容体を介してマクロファージの免疫機能を促進することが明らかになった。

In this study, で で, 1. The higher-order structure を has さな さな ヌ レ レ シドを シドを シドを modification する enzyme actually exists in する する ヌ シドを? Youdaoplaceholder0 enzyme そ he jiao? 2. What is the significance of the new regulation on bacteria における, ヌ レ, レ, シド, modification of the <s:1> and what is its <e:1>? 3. New regulations modify ヌ レ ヌ シドが シドが physiologically active substances と て Functions する て? The agen agen するなら the acceptor するなら what? Youdaoplaceholder0 と う ask と に answer える study を practice て る る る. Our は ", last year with し た m3A 発 now by let body の organization な ら び に 発 now を quantitative PCR method in the cell な ら び に ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ で ト method with fixed し た. そ の results, thymus や マ ク ロ フ ァ ー ジ な ど の immunohistochemical や cells, さ ら に renal viscera に く distribution more し て い る こ と が points か っ た. Renal viscera で の distribution に つ い analytical line を っ て, detailed な た results, urine tube に く distribution し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. そ こ で, m3A, let the body more than を く 発 now し て い る ヒ ト 単 ball origin M1 お よ び M2 マ ク ロ フ ァ ー ジ を し, 1 nM か ら 1 microM の concentration で m3A で 処 Richard し た. 処 Richard に RNA を back after 1 time 収 し, イ ン タ ー ロ イ キ ン の 発 now に つ い て qPCR method で beg し 検 た. そ の results, m3A は concentration dependent に イ ン タ ー ロ イ キ ン の 発 を now promote す る こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に m3A が cells raised colonization や ア ポ ト ー シ ス な ら び に cellular mobile な ど に は influence を and ぼ す か WST - 1 ア ッ セ イ, TUNEL staining な ら び に cell wandering ア ッ セ イ で beg し 検 た. そ の results, m3A は や, cell rights colonization ア ポ ト ー シ ス な ら び に cellular mobile に は influence を and ぼ さ な い こ と が Ming ら か に な っ た. の above results よ り, m3A は m3A を interface by let body し て マ ク ロ フ ァ ー ジ の immune function を promote す る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

細菌特異的修飾ヌクレオシドによる自然免疫応答メカニズムの解明

通过细菌特异性修饰核苷阐明先天免疫反应机制

• 发表时间: 2023
• 作者: Hiroko Kishi;Keisuke Shigenobu;Tatsuo Miyamoto;伊藤 美菜子;島村美帆
• 通讯作者: 島村美帆