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シナプス小胞エンドサイトーシス関連蛋白の翻訳後修飾制御機構に関する研究

突触小泡内吞相关蛋白翻译后修饰调控机制研究

基本信息

批准号：
18050026
负责人：
富澤一仁
金额：
$ 4.22万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

シナプス小胞のエンドサイトーシスは、エンドサイトーシス関連蛋白質により制御されており、多くの同関連蛋白質が同定されている。従来の研究より、これらエンドサイトーシス関連蛋白質がリン酸化による翻訳後修飾を受け、それにより機能制御されていることが判明している。本研究では、リン酸化・脱リン酸化以外の翻訳後修飾制御機構について明らかにすることを目的とし遂行した。その結果、アンフィファイジンの限定分解が同蛋白の機能ならびにシナプス小胞エンドサイトーシスを制御していることを明らかにした。初代培養神経細胞ならびに海馬スライスを高カリウムで刺激すると、アンフィファイジンが51、47、43kDaに限定分解された。また海馬スライスを10 Hzで1分間以上刺激をしても同様の限定分解が認められた。このアンフィファイジンの限定分解を引き起こす蛋白分解酵素が、カルシウム依存性蛋白分解酵素、カルパインであることを突き止めた。質量分析法によりアンフィファイジンの限定分解部位の同定に成功した。アンフィファイジンは、CLAPドメインよりC末端側の9箇所で切断されていた。FM-dyeによるシナプス小胞イメージングにより、限定分解されたアンフィファイジンは、シナプス小胞のエンドサイトーシスを抑制することが分かった。さらにアンフィファイジンの限定分解は、in vivoでも見られた。マウスにカイニン酸を投与してんかん発作を誘発すると、同限定分解が認められた。カルパイン阻害剤を投与し限定分解を抑制すると限定分解が拗制され、一方てんかん発作が促進された。以上のことから、神経が過興奮時、アンフィファイジンがカルパインにより限定分解されシナプス小胞のリサイクリングを阻害することにより、神経の過興奮を抑制する働きがあることが示唆された。

The small cells, the small cells, the proteins, the proteins. In order to study the situation, we need to make sure that the protein is acidified, and that after the repair, the machine can make sure that the system is correct. In this study, in addition to acidizing, acidizing and acidizing, the imperial institution has made it clear that the purpose of this study is to achieve the goal of acidizing and acidification. The results show that the decomposition of the same protein can be controlled by the same protein mechanism. in the results of the results, the results show that the decomposition of the same protein can be restricted to the same protein. In the first generation, the gods were exposed to high levels of stimulation, stimulation and limited decomposition of 51, 47 and 43kDa. The stimulation of more than 10 Hz minutes in the sea is limited to the decomposition of the same concentration. The restriction of proteolytic enzyme, the dependent proteolytic enzyme, the restriction of proteolytic enzyme, the enzyme of proteolytic enzyme. The quantitative analysis method was used to determine the success of the decomposition site. Please cut off the cutoff at the end of the C-terminal at the end of the C-terminal at the end of the CLAP. FM-dye cells are divided into small cells, and so on. Limit decomposition, in vivo decomposition, limit decomposition and limit decomposition. In the same way, you can decompose the same amount of acid as the same limit. The investment and the limited decomposition inhibit the limited decomposition, while the other side acts as the promotive agent. In the event that the above information is not available, the god may use it to limit the decomposition of the small cell, prevent the cell from causing damage, and instigate the instigation of the signal through the device.