基底レベルの感染防御を担うウイルス抑制シグナルの解明

阐明负责基础水平感染保护的病毒抑制信号

• 批准号: 21H02746
• 负责人: 山根 大典
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02746/
• 关键词: 自然免疫; インターフェロン制御因子; 肝炎ウイルス; ウイルス

これまで重要視されてきたウイルスに「応答」して活性化されるシグナル伝達機構に対し、恒常的な抗ウイルス防御層を制御する仕組みについてはほとんど解明されていない。研究代表者らは、恒常的にウイルス感染を抑制する機能をもつことを既に見出しているIRF1について、翻訳後修飾を介した活性化機構の解析を行った。FLAGタグをもつIRF1を哺乳細胞内に過剰発現し、抗FLAG抗体を用いて分離精製したタンパク質の翻訳後修飾を調べたところ、リン酸化候補サイトを複数見出した。同定した候補アミノ酸残基をアラニン置換した変異体を作製し転写機能を調べたところ、これらのリン酸化サイトは転写活性に寄与しないことが判明した。FLAG標識されたIRF1を分離精製する過程でIRF1に結合する宿主因子が同時に分離されることから、IRF1精製産物をショットガンプロテオミクスの手法を用いて解析したところ、多数の宿主因子をIRF1結合因子として見出した。これらの因子の中から、自然免疫および転写調節に関与することが報告されているものを絞り込み、遺伝子ノックダウン解析によりIRF1転写制御および抗ウイルス機能を評価したところ、CSNK2BをIRF1の抗ウイルス機能を促進する因子として同定した。CSNK2Bはカゼインキナーゼ2複合体のうちリン酸化酵素活性をもたない調節サブユニットであり、CSNK2BによるIRF1活性制御はIRF1のリン酸化を伴わないことが示唆された。CSNK2BがIRF1を制御するメカニズムについて調べたところ、IRF1の標的DNA配列への結合親和性を有意に変化させることでIRF1の転写能を正に制御していることが判明した。これらの結果から、IRF1の抗ウイルス活性はIRF1の発現量のみならず、細胞内のCSNK2Bの発現状態によっても調節され得ることが明らかとなった。

Important visual さ こ れ ま で れ て き た ウ イ ル ス に "応 answer" し て activeness さ れ る シ グ ナ ル 伝 of institutions に し seaborne, constant resistance な ウ イ ル ス defense layer を suppression す る blackstone group み に つ い て は ほ と ん ど interpret さ れ て い な い. Research representatives ら は, constant に ウ イ ル ス を inhibiting infection す る function を も つ こ と を に see both the し て い る IRF1 に つ い て, modification after turn 訳 を interface し た activeness institutions の parsing line を っ た. FLAG タ グ を も つ IRF1 を に mammalian cell before turning 発 し now, resistance to FLAG antibody を with い て separation of refined し た タ ン パ ク qualitative の modification after turn 訳 を adjustable べ た と こ ろ, リ ン acidification alternate サ イ ト を plural shows し た. With fixed し た alternate ア ミ ノ acid residues を ア ラ ニ ン replacement し た - variant を cropping し planning write function を adjustable べ た と こ ろ, こ れ ら の リ ン acidification サ イ ト は activity planning write に send and し な い こ と が.at し た. FLAG logo さ れ た IRF1 を separation of refined す る process で IRF1 に combining す る host factors が に separation at the same time さ れ る こ と か ら, IRF1 refined product を シ ョ ッ ト ガ ン プ ロ テ オ ミ ク ス の gimmick を with い て parsing し た と こ ろ, most の host factors を IRF1 combination factor と し て shows し た. こ れ ら の factor in の か ら, natural immune お よ び planning write adjust に masato and す る こ と が report さ れ て い る も の を ground り 込 み, but 伝 ノ ッ ク ダ ウ ン parsing に よ り IRF1 planning write suppression お よ び resistance ウ イ ル ス function を review 価 し た と こ ろ, CSNK2B を IRF1 の resistance ウ イ ル ス function を promote す る factor と し て with fixed し た. CSNK2B は カ ゼ イ ン キ ナ ー ゼ 2 complex の う ち リ ン acidification enzyme activity を も た な い adjust サ ブ ユ ニ ッ ト で あ り, CSNK2B に よ る IRF1 active suppression は IRF1 の リ ン acidification を with わ な い こ と が in stopping さ れ た. CSNK2B が IRF1 を suppression す る メ カ ニ ズ ム に つ い て adjustable べ た と こ ろ, IRF1 の target DNA match column へ の combined with affinity を intentionally に variations change さ せ る こ と で IRF1 の planning can write を is に suppression し て い る こ と が.at し た. こ れ ら の results か ら, IRF1 の resistance ウ イ ル ス active は IRF1 の 発 amount is の み な ら ず, intracellular の CSNK2B の 発 now state に よ っ て も adjust さ れ must る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

脂肪酸不飽和化酵素を介したC型肝炎ウイルス複製とフェロトーシスの制御

通过脂肪酸去饱和酶控制丙型肝炎病毒复制和铁死亡

• 发表时间: 2022
• 作者: LI HAOKUN;難波ひかる;小川寛人;本田知之;山根大典
• 通讯作者: 山根大典

Interferon regulatory factor 1 (IRF1) and anti-pathogen innate immune responses.

• DOI: 10.1371/journal.ppat.1009220
• 发表时间: 2021-01
• 期刊: PLoS pathogens
• 影响因子: 6.7
• 作者: Feng H;Zhang YB;Gui JF;Lemon SM;Yamane D
• 通讯作者: Yamane D

A CBP/β-catenin signaling inhibitor, PRI-724 ameliorates NASH-induced liver fibrosis and disorder

PRI-724 是一种 CBP/β-连环蛋白信号传导抑制剂，可改善 NASH 诱导的肝纤维化和疾病

• 发表时间: 2022
• 作者: Yamaji K;Tokunaga Y;Iwabuchi S;Hashimoto S;Yamane D;Toyama S;Kitab B;Kimura K;Tsukiyama-Kohara K;Kohara M.
• 通讯作者: Kohara M.

レポーター遺伝子を持つ組換えA型肝炎ウイルスを用いた抗ウイルス低分子化合物の探索

利用带有报告基因的重组甲型肝炎病毒寻找抗病毒低分子化合物

• 发表时间: 2021
• 作者: 鈴木亮介;松田麻未;西山直子;小林さくら;鈴木祐成;結城（平井）明香;山根大典;村松正道
• 通讯作者: 村松正道

FADS2-dependent fatty acid desaturation dictates cellular sensitivity to ferroptosis and permissiveness for hepatitis C virus replication.

• DOI: 10.1016/j.chembiol.2021.07.022
• 发表时间: 2022-05-19
• 期刊: Cell chemical biology
• 影响因子: 8.6
• 作者: Yamane D;Hayashi Y;Matsumoto M;Nakanishi H;Imagawa H;Kohara M;Lemon SM;Ichi I
• 通讯作者: Ichi I