患者iPS細胞と疾患モデル動物による遺伝性難聴への内耳AAVゲノム編集治療の開発
使用患者 iPS 细胞和疾病模型动物开发内耳 AAV 基因组编辑疗法治疗遗传性听力损失
基本信息
- 批准号:21H03089
- 负责人:
- 金额:$ 11.15万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
- 财政年份:2021
- 资助国家:日本
- 起止时间:2021-04-01 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究では、独自開発の改変型AAVベクターとiPS由来疾患モデル細胞(特許出願済)を用いた遺伝性難聴への内耳AAVゲノム編集技治療法の開発研究である。標的 とするのは遺伝性難聴最大の原因遺伝子GJB2(コネキシン26)の遺伝子変異であり、変異ゲノムの修復による根本的治療法を開発する。これまで分化誘導法の改良によりiPS細胞からCX26およびCX30によるギャップ結合を形成する内耳細胞シートを開発し(Human Molecular Genetics, 2021)、更なる条件検討によりギャップ結合複合体を形成する高分化型の細胞シートを作製した。また、マウス内耳ゲノム編集用AAVベクターの作製を 行い、蝸牛上皮全般に遺伝子導入が可能な内耳細胞用カプシド改変型AAVベクターを特許出願した(特願2021-198101)。同ベクターによりCRISPR/Cas技術でのゲ ノム編集用ベクターの設計を行った。これまでにガイド(g)RNA、Cas9 (CRISPR associated protein 9)、変異修復用ドナーDNA (ssODN: single-strand oligo deoxy nucleaotides)によるゲノム編集ツールおよびABE(Adenine Base Editor)を用いたゲノム編集ツールを各々設計し、独自開発のAAVに搭載した遺伝子導入用 ベクターを作製した。これらをマウス内耳へ遺伝子導入するための投与法の技術開発を行った。新規AAV開発では蝸牛支持細胞への感染特異性の高い改変型カプシドを選抜し、さらにプロモーター改良により同細胞での発現特異性を向上させた。
This study で は, alone 発 の change - type AAV ベ ク タ ー と iPS origin disease モ デ ル cells (a special 済) を with い た heritage 伝 sex difficult 聴 へ の inner ear AAV ゲ ノ の open 発 compiling technology ム therapy research で あ る. Mark と す る の は heritage 伝 sex difficult 聴 の biggest reason but 伝 child GJB2 (コ ネ キ シ ン 26) の heritage 伝 sub - different で あ り, - different ゲ ノ ム の repair に よ る radical therapy を open 発 す る. Modified に こ れ ま で differentiation candidated の よ り iPS cells か ら CX26 お よ び CX30 に よ る ギ ャ ッ プ combined を form す る inner ear cells シ ー ト を open 発 し (Human Molecular Genetics, 2021), more な 検 る conditions for に よ り ギ ャ ッ プ combined with complex を form す る high differentiated cells の シ ー ト を cropping し た. ま た, マ ウ ス inner ear ゲ ノ ム compiled with AAV ベ ク タ ー の cropping を い, snail epithelial all traces of に 伝 son import が may な inner ear cells with カ プ シ ド change - type AAV ベ ク タ ー を out special し た (2021-198101, may). With ベ ク タ ー に よ り CRISPR/Cas technology で の ゲ ノ ム compiled with ベ ク タ ー の line design を っ た. Youdaoplaceholder0 ド(g)RNA, Cas9 (CRISPR associated protein 9), ドナ ドナ DNA for mutation repair (ssODN:) Single - strand oligo deoxy nucleaotides) に よ る ゲ ノ compiling ツ ム ー ル お よ び ABE (Adenine Base Editor) を with い た ゲ ノ compiling ツ ム ー ル を 々 し design, open each 発 の AAV に carry し た 伝 import with son Youdaoplaceholder0 タ タ を を make た. <s:1> れらを ウス ウス inner ear へ 伝 seed introduction するため <s:1> casting method <e:1> technique development を performance った. New rules on AAV open 発 で は snail support cells へ の infection type high specificity の い change - カ プ シ ド を sorting し, さ ら に プ ロ モ ー タ ー improved に よ り with cell で の 発 specificity を さ up now せ た.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Effects of Salicylate Derivatives on Localization of p.H723R Pendrin Mutant.
水杨酸酯衍生物对 p.H723R Pendrin 突变体定位的影响。
- DOI:10.1016/j.anl.2022.03.009
- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:1.7
- 作者:Murakoshi M;Koyama S;Kobayashi T;Usami S;Kamiya K;Ikeda K;Haga Y;Tsumoto K;Nakamura H;Hirasawa N;Ishihara K;Wada H.
- 通讯作者:Wada H.
Generation of two iPSC lines from siblings of a homozygous patient with hearing loss and a heterozygous carrier with normal hearing carrying p.G45E/Y136X mutation in GJB2
从患有听力损失的纯合子患者和携带 GJB2 p.G45E/Y136X 突变的听力正常的杂合子携带者的兄弟姐妹中生成两个 iPSC 系
- DOI:10.1016/j.scr.2021.102290
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:1.2
- 作者:Fukunaga Ichiro;Oe Yoko;Danzaki Keiko;Ohta Sayaka;Chen Cheng;Iizumi Madoka;Shiga Takahiro;Matsuoka Rina;Anzai Takashi;Hibiya-Motegi Remi;Tajima Shori;Ikeda Katsuhisa;Akamatsu Wado;Kamiya Kazusaku
- 通讯作者:Kamiya Kazusaku
Modeling Gap junction beta 2 gene-related deafness with human iPS
使用人类 iPS 模拟间隙连接 beta 2 基因相关性耳聋
- DOI:10.1093/hmg/ddab097
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:3.5
- 作者:Ichiro Fukunaga;Yoko Oe;Keiko Danzaki;Sayaka Ohta;Cheng Chen;Kyoko Shirai;Atsushi Kawano;Katsuhisa Ikeda;Kazusaku Kamiya
- 通讯作者:Kazusaku Kamiya
Association Between Earwax-Determinant Genotypes and Acquired Middle Ear Cholesteatoma in a Japanese Population
日本人群中耳垢决定基因型与获得性中耳胆脂瘤之间的关联
- DOI:10.1177/01945998211000374
- 发表时间:2021
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Hara Satoshi;Kusunoki Takeshi;Nakagawa Hiroshi;Toyoda Yu;Nojiri Shuko;Kamiya Kazusaku;Furukawa Masayuki;Takata Yusuke;Okada Hiroko;Anzai Takashi;Matsumoto Fumihiko;Ikeda Katsuhisa
- 通讯作者:Ikeda Katsuhisa
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
池田 勝久其他文献
アレルギー性鼻炎におけるデジタルフェノタイピング
过敏性鼻炎的数字表型分析
- DOI:
- 发表时间:
2022 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
中村 真浩;井出 拓磨;野島 愛来;伊藤 伸;田島 勝利;池田 勝久;松本 文彦;中村真浩 - 通讯作者:
中村真浩
術後病理にて悪性腫瘍であることが判明した耳下腺癌の検討
腮腺癌检查术后病理证实为恶性肿瘤
- DOI:
- 发表时间:
2021 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
久保 怜子;松本 文彦;左京 愛莉;小島 崇史;鈴木 陽;小島 雅貴;藤巻 充寿;大峡 慎一;池田 勝久 - 通讯作者:
池田 勝久
In vitro modeling of hereditary hearing loss with human iPSC technology: Cellular pathology and drug discovery
利用人类 iPSC 技术进行遗传性听力损失的体外建模:细胞病理学和药物发现
- DOI:
- 发表时间:
2018 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
池田 勝久;大庭 亜由子;伊藤 伸;岡田 弘子;安齋 崇;細谷 誠 - 通讯作者:
細谷 誠
重度閉塞性睡眠時無呼吸症の治療に苦慮したダウン症児症例
一例患有唐氏综合症的儿童,难以治疗严重的阻塞性睡眠呼吸暂停。
- DOI:
- 发表时间:
2018 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
井下 綾子;佐田 直子;池田 勝久 - 通讯作者:
池田 勝久
【スギ花粉症の発症と初期治療】 スギ花粉症患者に対する初期治療前後の生理学的評価(原著論文/特集)
[柳杉花粉热的发病及初始治疗]柳杉花粉热患者初始治疗前后的生理评估(原论文/特刊)
- DOI:
- 发表时间:
2013 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
塩沢 晃人;三輪 正人;池田 勝久 - 通讯作者:
池田 勝久
池田 勝久的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('池田 勝久', 18)}}的其他基金
難聴遺伝子変異マウスへのiPS細胞移植による難聴レスキュウー
将iPS细胞移植到耳聋基因突变小鼠中挽救听力损失
- 批准号:
21659394 - 财政年份:2009
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
小学校英語カリキュラムマネジメントのためのワークショップ研修の開発
小学英语课程管理工作坊培训的开展
- 批准号:
21909001 - 财政年份:2009
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
遺伝子改変動物を用いたコルチリンパのホメオスターシスに関する分子メカニズムの解析
利用转基因动物分析皮质淋巴稳态的分子机制
- 批准号:
17659538 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
Gjb2のコンディショナル・ノックアウト・マウスの遺伝子導入による難聴レスキュー
Gjb2条件性敲除小鼠基因转移挽救听力损失
- 批准号:
15659402 - 财政年份:2003
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Exploratory Research
共焦点レーザ顕微鏡による蝸牛のイオン輸送の細胞分子生理学的研究
使用共焦激光显微镜进行耳蜗离子传输的细胞和分子生理学研究
- 批准号:
08457447 - 财政年份:1996
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
共焦点レーザー顕微鏡とビデオ強化装置を用いた蝸牛の細胞分子生理学的研究
使用共焦激光显微镜和视频增强设备对耳蜗进行细胞和分子生理学研究
- 批准号:
07457394 - 财政年份:1995
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
鼻腺細胞の分泌機序に関する分子生理学的研究
鼻腺细胞分泌机制的分子生理学研究
- 批准号:
06807131 - 财政年份:1994
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
分子生理的手法による蝸牛のイオン輸送機構の解明
利用分子生理学方法阐明耳蜗中的离子传输机制
- 批准号:
05807156 - 财政年份:1993
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
蝸牛血管条におけるイオン輸送機序と細胞機能
耳蜗血管纹中的离子传输机制和细胞功能
- 批准号:
03857213 - 财政年份:1991
- 资助金额:
$ 11.15万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)