肺腺癌細胞においてミトコンドリアに局在するOCIAD2の機能的意義の検証

肺腺癌细胞线粒体中OCIAD2功能意义的验证

• 批准号: 19K07455
• 负责人: 柴 綾
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-01-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K07455/
• 关键词: 肺腺癌; アポトーシス; ミトコンドリア; OCIAD2

OCIAD2は浸潤性肺腺癌において過剰発現している遺伝子であり、正常肺では発現がないため 非常に腫瘍特異性が高い。高発現群は低発現群に比べて有意に予後不良であり、肺腺癌の悪性化において何らかの機能を持つことが示唆される。本研究ではOCIAD2のミトコンドリアにおける機能に焦点を絞り、OCIAD2を発現抑制した肺腺癌細胞を用いて増殖やアポトーシスに与える影響をin vitroで解析する。本研究課題により、OCIAD2はミトコンドリア膜に局在することが確認され、OCIAD2をノックダウンすることにより１細胞当たりのミトコンドリア数、１ミトコンドリア当たりのクリステ数が顕著に減少し、OCIAD2はミトコンドリアの形態維持や機能に何かしらの働きを持っていると考えられた。次に、OCIAD2をノックダウンした肺腺癌細胞でアポトーシスを検出すべく、caspase等の活性測定やAnenxin Vをマーカーとした細胞膜構造変化解析、チクロトームcの発現・局在解析を行った。その結果、OCIAD2ノックダウンによりチトクロームcの放出やcaspase-3,9, PARPの開裂が見られ、アポトーシスが誘導されていることが明らかになった。さらに、ミトコンドリア膜電位がOCIAD2ノックダウンにより低下することもわかり、OCIAD2が膜電位の維持に寄与している可能性が示唆された。OCIAD2をノックダウンした3種の細胞を用いたRNA-seqを実施し、OCIAD2がpro-apoptotic initiator, cell cycle, ER stressなどに係る遺伝子を制御している可能性が示され、今後はOCIAD2がアポトーシス抑制という機能を果たすためにkeyとなる因子の同定を目指す。

OCIAD2 infiltrating lung adenocarcinomas showed that the incidence of lung cancer was abnormal, while that of normal lung cancer was very high. In the high-risk group, the low-risk group, the high-risk group, the low-group group, the high group, the low group, the lung adenocarcinoma, the lung adenocarcinoma. The purpose of this study was to determine the effect of OCIAD2 on lung adenocarcinoma cells. The results showed that the inhibition of lung adenocarcinoma cells was detected by in vitro and in vitro. In this study, the research results show that the OCIAD2 monitoring system is responsible for confirming the performance, the OCIAD2 monitoring system is responsible for determining the number of users, and the OCIAD2 monitoring system is responsible for the reduction of the number of data. The activity of Anenxin V, caspase and so on was determined by Anenxin V activity assay, cell membrane formation assay, cell membrane assay, cell membrane assay and so on. The results show that OCIAD2 failed to send out the caspase-3,9, and the PARP was opened to show that the message is correct. The potential of the OCIAD2 and OCIAD2 is not affected. The possibility of the maintenance of the potential and the possibility of failure is indicated. The three kinds of cell of OCIAD2 are used to control the possibility of key by using the cell cycle, OCIAD2pro-apoptotic initiator, OCIAD2 and OCIAD2. In the future, the performance of the inhibition mechanism is the same as that of the key indicator.