Site-specific lipidation of antibodies for immunoliposome-like anti-cancer drugs

免疫脂质体样抗癌药物抗体的位点特异性脂质化

• 批准号: 19K15369
• 负责人: 高原 茉莉
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kitakyushu National College of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K15369/
• 关键词: 両親媒性ペプチド; イムノリポソーム; 抗体; 脂質修飾; 微生物由来トランスグルタミナーゼ; リポソーム

本研究においては、高い薬物搭載量のリポソーム及び標的特異性に優れた抗体の利点を最大限に生かした、抗体を係留したリポソーム (イムノリポソーム) 開発に向けて、微生物由来トランスグルタミナーゼ (MTG) を介した部位特異的に脂質化抗体を合成することである。MTGとは、特定のグルタミン (Q) およびリジン (K) 側鎖間の架橋反応を触媒する酵素である。本年度は、MTG反応を介して抗体へ修飾可能な脂質ペプチド基質の設計を行なった。具体的には、リポソームの係留部位として飽和脂肪酸 (Cn)が、ポリエチレングリコール (PEG) リンカーを介してMTG基質配列に付与された、脂質化ペプチド基質 (Cn-PEG-RHK) を設計した。このRHK基質配列は、塩基性アミノ酸R及びHと隣接することでMTGが認識可能なリジン (K) となり、RHK配列の親水性と飽和脂肪酸の疎水性により両親媒性を示す。さらに昨年度まで用いた脂質化ペプチド基質 (Cn-G3S-RHK) のG3SリンカーをPEGと変更することで抗体とのMTG反応効率の向上を狙った。抗体用の脂質化ペプチド基質は、乳がん細胞に過剰発現したHer受容体と相互作用するHer2抗体をモデルとしてMTG反応条件の最適化を行なった。抗体はまず脱糖鎖酵素PNGaseFによりMTGが認識可能なグルタミン (Q) を露出させた後、脂質化ペプチド (Cn-PEG-RHKもしくはCn-G3S-RHK) を過剰量添加してMTG反応を行なったところ、Cn-PEG-RHKを添加した場合は抗体への脂質化ペプチドラベルが示唆された。

The advantages of this study are the advantages of high specificity, high loading capacity, and specificity of the antibody, including the maximum limit of raw material and the retention of antibody. (イムノリポソーム) 开発に向けて、The origin of microorganisms トランスグルタミナーゼ (MTG) We synthesize site-specific lipidated antibodies from our company. MTG とは, specific のグルタミン (Q) およびリジン (K) side lock bridging reaction をcatalyst するenzyme である. This year, MTG anti-antibodies and modified lipid-based substrates are designed and implemented. Specifically, には, リポソームの tethered parts, として saturated fatty acid (Cn), ポリエチレングリコール (PEG) The リンカーをmediated MTG matrix formulation is applied and the lipidated ペプチド matrix (Cn-PEG-RHK) is designed.このRHK matrix arrangement は, hydroxyl amine acid R and びH と adjacent することでMTG が なリジン (K) The hydrophilic and saturated fatty acid-based hydrophilic properties of Ena and RHK are shown in the figure. The last year's さらにまでいたlipidized ペプチド matrix (Cn-G3S-RHK)のG3S リンカーをPEG と変 Updated することでAntibody and とのMTG reaction efficiency の を sniper った. The antibody was optimized using a lipid-containing matrix, a milk-containing cell, a Her receptor, and a Her2 antibody that interacted with the MTG reaction conditions. Antibody はまずDeglycolockase PNGaseFによりMTGがKnowledge possibleなグルタミン (Q) をExposed させた, lipidated ペプチド (Cn-PEG-RHKもしくはCn-G3S-RHK) In the case of adding excessive amounts of MTG reaction and Cn-PEG-RHK, the antibody is lipidated and the antibody is lipidated.

项目成果

酵素反応による部位特異的なタンパク質ジアシル化法の開発

利用酶反应开发位点特异性蛋白质二酰化方法

• 发表时间: 2020
• 作者: 高原 茉莉;若林 里衣;南畑 孝介;後藤 雅宏;神谷 典穂
• 通讯作者: 神谷 典穂

Extending the Half-Life of a Protein in Vivo by Enzymatic Labeling with Amphiphilic Lipopeptides

通过两亲性脂肽酶标记延长体内蛋白质的半衰期

• DOI: 10.1021/acs.bioconjchem.1c00027
• 发表时间: 2021
• 期刊: Bioconjugate Chemistry
• 影响因子: 4.7
• 作者: Mari Takahara ; Shinichi Mochizuki ; Rie Wakabayashi ; Kosuke Minamihata ; Masahiro Goto ; Kazuo Sakurai ; Noriho Kamiya
• 通讯作者: Noriho Kamiya

翻訳後修飾酵素を用いたタンパク質の人工脂質修飾プロセス

使用翻译后修饰酶对蛋白质进行人工脂质修饰的过程

• 发表时间: 2020
• 作者: 高原 茉莉;若林 里衣;後藤 雅宏;神谷 典穂
• 通讯作者: 神谷 典穂

両親媒性リポペプチドを用いた酵素反応による脂質化タンパク質合成

使用两亲性脂肽通过酶促反应合成脂质化蛋白质

• 发表时间: 2020
• 作者: 高原 茉莉;若林 里衣;後藤 雅宏;神谷 典穂
• 通讯作者: 神谷 典穂

Peptide Amphiphiles for Site-Specific Protein-Drug Conjugates

用于位点特异性蛋白质药物缀合物的肽两亲物

• 发表时间: 2019
• 作者: Tenki Miura;Noriho Kamiya and Mari Takahara
• 通讯作者: Noriho Kamiya and Mari Takahara