ゼブラフィッシュを用いた上皮-間葉相互作用検出システムの構築とその応用

斑马鱼上皮间质相互作用检测系统的构建及其应用

• 批准号: 20J11690
• 负责人: 田 甜
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-24 至 2022-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20J11690/
• 关键词: 歯; 上皮－間葉相互作用; 形態形成; ドラッグスクリーニングモデル; CAGE法; 器官培養法; 遺伝子スクリーニング; ドラッグスクリーニング

本年度は主に、昨年度開発した器官培養法を用いたドラッグスクリーニングモデルを用いて、抗がん剤の副作用回避モデルの構築を行い、副作用回避法の検討を行った。マウス胎仔歯胚にCPAを添加し、器官培養法にて培養したところ、形態形成期にあたる胎生14日齢 (E14)およびE16の歯胚において、成長の阻害を認めたが、分化期であるE18では、形成阻害は認められなかった。次に、同モデルを用いて副作用回避法の検索を行った。CPAを添加する最初の3日間のみ25℃の低温刺激下で培養を行った結果、正常な歯胚形成が認められた。そこで、CAGE法を用いて網羅的遺伝子発現解析を行ったところ、CPA添加時に低温培養を行った歯胚において、G1/S細胞周期チェックポイントに関連する遺伝子の発現低下を確認した。さらに、歯原性上皮細胞株M3H1細胞を用いて、in vitro解析を行ったところ、Rbのリン酸化が低温によって阻害され、G1/S細胞周期チェックポイントであるRポイントを乗り越えられずに、G１期での細胞周期停止が起こることが明らかになった。低温培養による細胞のS期進行阻害とG1期蓄積により、CPAの架橋反応による細胞障害を防ぐことができることを示唆した。これらの結果から、CPAの臓器形成に与える副作用は、低温に維持することで回避できることが明らかになった。本研究は、抗がん剤の副作用を検出および評価する新たなスクリーニングモデルの構築を通して、将来の抗がん剤副作用回避法の開発への応用に寄与すると考えられる。

は に Lord this year, yesterday's annual 発 し た organ culture method を with い た ド ラ ッ グ ス ク リ ー ニ ン グ モ デ ル を with い て, resisting が ん tonic の side effects to avoid モ デ ル の line build を い, side effects to avoid の 検 line for を っ た. マ ウ ス tire tsai 歯 embryo に CPA を add し, organ culture method に て cultivate し た と こ ろ, shape formation に あ た る 齢 viviparous 14 (E14) お よ び E16 の 歯 embryo に お い て, growth の resistance against を め た が, differentiation stage で あ る E18 で は, forming resistance against は め ら れ な か っ た. Then に, the same as モデ モデ を を を, use the に て side effect avoidance method 検 検 to を and った. CPA を add す る initially の 3 day の み 25 ℃ の で under low temperature stimulation training line を っ た results, normal な 歯 embryogenesis が recognize め ら れ た. そ こ で, CAGE を with い て snare's son 伝 発 now line analytical を っ た と こ ろ, CPA when adding に low temperature raises を line っ た 歯 embryo に お い て, G1 / S cell cycle チ ェ ッ ク ポ イ ン ト に masato even す る heritage 伝 son の 発 now low を confirm し た. さ ら に, 歯 original epithelial cell lines M3H1 cells を using い て, the in vitro analytical line を っ た と こ ろ, Rb の リ ン acidification が cryogenic に よ っ て resistance against さ れ, G1 / S cell cycle チ ェ ッ ク ポ イ ン ト で あ る R ポ イ ン ト を 乗 り more え ら れ ず に, G1 phase で の cell cycle stopped が こ る こ と が Ming ら か に な っ た. Cryogenic cultivate に よ る cell の S phase resistance against と G1 phase accumulation に よ り, CPA の bridging the 応 に よ る cells handicap of を anti ぐ こ と が で き る こ と を in stopping し た. こ れ ら の results か ら, CPA and に の viscera え は る side effects, low temperature に maintain す る こ と で avoid で き る こ と が Ming ら か に な っ た. This study は, resisting が ん tonic の side-effects を 検 out お よ び review 価 す る new た な ス ク リ ー ニ ン グ モ デ ル の build を tong し て, future の resistance が ん tonic effects avoidance method の open 発 へ の 応 に send and す る と exam え ら れ る.

项目成果

The role of basement membrane protein Nephronectin in tooth development.

基底膜蛋白肾连蛋白在牙齿发育中的作用。

• 发表时间: 2021
• 作者: Kanji Mizuta;Keigo Yoshizaki;Kanako Miyazaki;Keita Funada;Tomomi Yuta;Tian Tian;Yao Fu;Jumpei Kawahara;Ichiro Takahashi
• 通讯作者: Ichiro Takahashi

GPI アンカー型タンパク質 Lypd1 は象牙芽細胞分化に重要な役割を果たす

GPI锚定蛋白Lypd1在成牙本质细胞分化中发挥重要作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 傅 堯;宮崎佳奈子;吉崎 恵悟;千葉 雄太;鮒田 啓太;田 甜;湯田 智美;水田 敢士;福本 敏;高橋 一郎
• 通讯作者: 高橋 一郎

デスモゾーム構成因子 Plakophilin 1 は核内移行シグナルを介して細胞増殖を制御する

桥粒成分 Plakophilin 1 通过核输入信号控制细胞增殖

• 发表时间: 2021
• 作者: 宮崎 佳奈子;吉崎 恵悟;傅 堯;鮒田 啓太;湯田 智美;田 甜;水田 敢士;川原 純平;福本 敏;高橋 一郎
• 通讯作者: 高橋 一郎

Gタンパク質共役型受容体Gpr111/Adgrf2はエナメル質の石灰化を制御する

G蛋白偶联受体Gpr111/Adgrf2调节牙釉质矿化

• 发表时间: 2021
• 作者: 千葉 雄太;吉崎 恵悟;田 甜;千葉 満生;韓 旭;稲田 幸織;福本 敏
• 通讯作者: 福本 敏

GPIアンカー型タンパク質Lypd1は歯の発生において象牙芽細胞分化を制御する

GPI锚定蛋白Lypd1控制牙齿发育中的成牙本质细胞分化

• 发表时间: 2021
• 作者: 傅 堯;宮崎 佳奈子;吉崎 恵悟;田 甜;鮒田 啓太;湯田 智美;水田 敢士;川原 純平;花田 彩圭;高橋一郎
• 通讯作者: 高橋一郎