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Discovery of the Prunus-specific self-incompatibility recognition system and its horticultural applications

李属特有的自交不亲和识别系统的发现及其园艺应用

基本信息

批准号：
19H00941
负责人：
田尾龍太郎
金额：
$ 28.87万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

（共通反応に関する仮説検証実験）昨年度に得られた結果の検証のため，異なるSハプロタイプ由来の組換えS-RNaseを用いた共免疫沈降実験を行ったところ，昨年度と同様にS-RNaseとMGSTの結合が確認されると同時にSFBとの結合も確認された．しかしながら，昨年度までの実験で検出されたDnaJ様タンパク質と同じタイプのDnaJ様タンパク質は検出されなかった．DnaJ様タンパク質は新たな共通因子候補であるため，この結果についてはさらに検証する必要がある．MGSTの立体構造をin silicoで検証したところ，チオレドキシン活性を持つ可能性が高いことを示唆する結果が得られた．（和合反応に関する仮説検証実験）S locus F-box likes（SLFLs）およびS haplotype-specific F box likes（SFBLs）によるS-RNaseのポリユビキチン化を様々な条件と実験手法により検討したが，現在までにS-RNaseのポリユビキチン化は見られていない．（不和合反応に関する仮説検証実験）昨年度に行った組み換えS-RNaseを用いたプルダウンアッセイで，雌ずい因子S-RNaseと花粉因子SFBの結合が初めて確認された．本年度，この検証のために異なるSハプロタイプの組み換えS-RNaseを用いた検証実験を行ったところ，昨年度と同様に自己特異的にS-RNaseとSFBが結合することが確認された．（組換え花粉を用いた証明実験）昨年度までの実験でデザインしたMGSTとSFBのアンチセンスオリゴを用いてin vitroおよびin vivoで両遺伝子のノックダウンにより不和合性反応の打破が認められたので，その結果を取り纏めて論文として発表した．

(the common 応に masato する仮 said 検 card be 験) annual に yesterday to られた results の検 card のため, different なる S ハプロタイプ origin in えの group S - RNase を with いた were immune to sink be 験を line ったところ, Last year, と identical にS-RNaseとMGST <s:1> binding が confirmed されると, and にSFBと <s:1> binding された confirmed された. しかしながら, yesterday's annual までの be 験で検 out された DnaJ others タンパク qualitative と with じタイプの DnaJ others タンパク qualitative は検 out されなかった. New た DnaJ others タンパク qualitative はな common factor alternate であるため, この results についてはさらに検 card する necessary がある. MGST の three-dimensional structure を in silico で検 card したところ, チオレドキシン activity likely がを hold ついことを in stopping する results らがれた. (Combined reaction 応に relation する仮 theory 検 evidence) S locus F-box likes (SLFLs) およびS haplotype-specific F-box Likes (SFBLs) による S - RNase のポリユビキチン change を others 々とな conditions be 験 gimmick により beg し検たが, now までに S - RNase のポリユビキチン change は see られていない. (and not the 応に masato する仮 said 検 card be 験) line yesterday annual にっみた group in え S - RNase を with いたプルダウンアッセイで, female ずい factor S - RNase と pollen factor SFB の combined with early がめて confirm された. Card this year, この検のために different なる S ハプロタイプみの group in え S - RNase を with いた検 card be 験を line ったところ, yesterday with others in the annual とに their specific に S - RNase と SFB が combining することが confirm された. (group in pollen をえいた proved be 験) yesterday annual までの be 験でデザインした MGST と SFB のアンチセンスオリゴを with いて in vitro および in vivo で struck heritage 伝 son のノックダウンにより schisms sex reverse 応の break が recognize められたので, Youdaoplaceholder0 そ results を take そ to entwined めて paper とてて shows たた.