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筋細胞における管状エンドソームの役割と組織特異的な形成機構の解明

阐明肌细胞中管状内体的作用和组织特异性形成机制

基本信息

批准号：
19J00533
负责人：
衞藤貫
金额：
$ 3.08万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J00533/
关键词：
管状エンドソーム低分子量G蛋白質

项目摘要

私は、これまでの研究の過程で、培養細胞を用いた実験系により、管状エンドソームは筋細胞特異的に形成されるオルガネラであることを見出した。また、ショウジョウバエをモデル系として生細胞イメージングを行うことで、培養細胞だけでなく実際に生きた個体の筋細胞においても管状エンドソームが形成されることを明らかにした。さらに、ショウジョウバエを用いて筋細胞特異的に管状エンドソームの必須制御因子Rab10のドミナントネガティブ変異体を過剰発現することで、「蛹を形成するために培養容器の壁を登るステップ」及び「蛹の殻を破る（羽化）ステップ」といった筋細胞を必要とする発生段階が阻害されることがわかった。本年度は、筋細胞特異的なRab10の阻害による筋細胞の構造や機能への影響を評価した。方法は、GAL4-UASシステムにより筋細胞特異的にmCD8-GFP(細胞膜・T管マーカー)を発現するショウジョウバエと筋細胞特異的にRab10をノックダウンするショウジョウバエを掛け合わせることで、管状エンドソームと筋細胞の膜構造の関係性を検討した。その結果、筋細胞特異的にRab10の機能を欠損すると筋細胞の形態に異常を来たし、個体の運動に悪影響を及ぼすことがわかった。正常な個体では、筋細胞は細胞外マトリックスと強固に結合し、適切な形態（棒状の構造）を維持しているが、筋細胞特異的にRab10をノックダウンした個体では筋細胞は細胞外マトリックスから剥がれ落ち、丸まった構造をとることがわかった。過去の報告によると、これまでの研究により管状エンドソームの積荷として同定した接着分子Integrin-b1のノックダウンも同様の表現型を示す。従って、筋細胞において管状エンドソームはIntegrin-b1を細胞表面に輸送することで、周囲の細胞外マトリックスとの接着を促進し、筋細胞の形態維持に寄与すると予想される。

The process of cell culture is described in this paper. In the case of cell culture, cell culture is the most important step in the development of cell culture. In addition, it is necessary to control the development of the cell specific tubular structure by using the Rab10 and the wall of the culture vessel during pupa formation and the development of the muscle cell structure during pupa formation. This year, we evaluated the effects of Rab10 on the structure and function of tendon cells. Methods To investigate the relationship between GAL4-UAS and tendon cell-specific mCD8-GFP(cell membrane/T tube) development and tendon cell-specific Rab10 development. The results, muscle cell-specific Rab10 function impairment, muscle cell morphology, individual movement, and other factors In normal individuals, the tendon cells are strongly bound to each other, and the appropriate morphology (rod-like structure) is maintained. The tendon cell-specific Rab10 is maintained. In individuals, the tendon cells are strongly bound to each other, and the structure is maintained. Previous studies have shown that the accumulation of charge in the tube-like system is consistent with the phenotype of Integrin-b1. The cell surface transport of Integrin-b1 is promoted by the tube-like structure of the tendon cell, and the extracellular structure of the tendon cell is maintained.