エクソソームによる細胞創薬としての新規骨再生材料の開発

使用外泌体开发新的骨再生材料作为细胞药物发现

• 批准号: 19K10195
• 负责人: 山田 陽一
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Osaka Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19K10195/
• 关键词: 再生医療

現在、重度歯槽骨吸収、萎縮の改善に対する骨造成法としては自家骨移植がスタンダードであるが、健常部位を損傷する、採取量に限界があるばかりか患者への侵襲が大きいなどの問題点があげられている。また、同種、異種他家骨、人工材料を用いる方法もあるが、骨形成能が不明確で、感染などの危険もあり、安全性や有効性が疑問視されているのが現状である。近年、細胞を用いた再生医療の研究が進み、臨床応用へと発展し、安全性、有効性が示唆されている。しかし、費用対効果などが懸念されている。一方、細胞から分泌されるエクソソームは、新規細胞間コミュニケーション因子として注目されており、由来する細胞と類似の機能を有することから、細胞移植に替わる新規治療剤として期待されている。そこで本研究では、間葉系幹細胞から分泌されるエクソソームを応用することで、新規骨再生療法を開発することを目的とした。本年度は、まずヒト歯髄・骨髄間葉系幹細胞由来エクソソーム回収方法の最適化を行った。具体的には、ヒト抜去歯（永久歯および乳歯）より歯髄組織を摘出して酵素処理を行い、歯髄由来間葉系幹細胞を分離・培養した。得られた細胞が間葉系幹細胞の特徴を有することをフローサイトメトリー解析にて確認した。歯髄・骨髄間葉系幹細胞を無血清培地で培養した後、培養上清を回収して後、フィルターで濾過し、エクソソームを回収した。回収したエクソソームを透過型電子顕微鏡にて観察（TEM）、粒径測定を行った結果、エクソソームが回収されていることが確認された。

Now, severe alveolar bone resorption, atrophy of the improvement of bone formation method, but not their own bone graft, normal parts of the injury, the amount of extraction limit, the patient's invasion, large, the problem point. The method of using the same kind of bone, heterogeneous bone and artificial material is not clear, the risk of infection is not clear, and the safety is not clear. In recent years, the research of regenerative medicine in cell therapy has been progressing, clinical application has been developed, safety and effectiveness have been demonstrated. The cost of the project is very high. A new regulation of cell-to-cell secretion, cell transplantation, and cell function is expected. The aim of this study is to develop new bone regeneration therapies by secreting mesenchymal stem cells. This year, the optimization of the method of stem cell regeneration was carried out. Specific to this process, dental tissue is extracted, enzyme treated, and mesenchymal stem cells isolated and cultured. Characteristics of mesenchymal stem cells After serum-free culture, culture supernatant was recovered, and then filtered. The results of TEM and particle size measurement were confirmed.