Molekulare Charakterisierung des PKHD1-Gens und seines Proteins Polyductin bei der autosomal rezessiven polyzystischen Nierenerkrankung (ARPKD)

Nerenkrankheit(ARPKD)是一种常染色体杂合性遗传病。DAS PKHD1-Gen，das wir im Rahmen eines Deutsch-amerikanischen konsortium zeitgleich MIT einer weiteren Arbeitsgruppe Identifizieren konnten，ist eines der grö？ten gene and kodiert ein neuartiges Protein(Polyductin/fificystin)von 4074 Aminosäuren unbekannter Funktion.DIE 86个外显子DES PKHD1基因被用来替代Spleiúen zu vielen unterschiedlichen，z.T.OrganSpezifischen Transkrigten zusammengefügt。Wder Umfang noch Funktion von Isoformen sind bekannt Polyductin is Wie and ere ZystoProteine im Bereich Primärer Zilien and ZtroSomSomen lokalisiert.这是一项新的研究，主要目的是为了更好地满足人们的需求。(A)Charakterisierung des PKHD7-genes einschlieülich differenziell gespleiüter ter Transklipte，(B)Charakterisierung von Spleiümuationen and Regatorischer Elemente，und(C)des PKHDf-MutationsSpektrum be Patienten MIT isolierter kongenitaler leberbetitaler leberbeteiligong and sehr温和的未婚者。(2)KLonierung von GST-FusionsProtein zur antikörpererzeugung and Generierung einer Kristallstrukut für einzelne Polyductin-Domänen。(3)免疫组织化学：von Polyductin Be Patienten MIT nachgewiesenen PKHD1-Mutationen。

Die autosomal rezessive polyzystische Nierenkrankheit (ARPKD) ist eine der wichtigsten Ursachen für Nierenversagen im Kindes- und Jugendalter. Das PKHD1-Gen, das wir im Rahmen eines deutsch-amerikanischen Konsortiums zeitgleich mit einer weiteren Arbeitsgruppe identifizieren konnten, ist eines der größten Gene und kodiert ein neuartiges Protein (Polyductin/ Fibrocystin) von 4074 Aminosäuren unbekannter Funktion. Die 86 Exons des PKHD1-Gens werden durch alternatives Spleißen zu vielen unterschiedlichen, z. T. organspezifischen Transkripten zusammengefügt. Weder Umfang noch Funktion von Isoformen sind bekannt Polyductin ist wie andere Zystoproteine im Bereich primärer Zilien und Zentrosomen lokalisiert. Die Aufklärung seiner Funktion(en) ist damit für das Verständnis der Zystogenese von herausragender Bedeutung.Im vorgelegten Projekt sind auf der Basis des weltweit größten Kollektivs von z. Z. ca. 900 klinisch gut charakterisierten Familien folgende Untersuchungen geplant: (1) Weitergehende Charakterisierung des PKHD7-Gens. (a) Charakterisierung des PKHD7-Gens einschließlich differenziell gespleißter Transkripte, (b) Charakterisierung von Spleißmutationen und regulatorischer Elemente, und (c) des PKHDf-Mutationsspektrums bei Patienten mit isolierter kongenitaler Leberfibrose/ prädominanter Leberbeteiligung und sehr mild betroffenen ARPKDPatienten. (2) Klonierung von GST-Fusionsproteinen zur Antikörpererzeugung und Generierung einer Kristallstruktur für einzelne Polyductin-Domänen. (3) Immunhistochemische Untersuchungen zur subzellulären Lokalisation von Polyductin bei Patienten mit nachgewiesenen PKHD1- Mutationen.