イネ種子の細胞内物質貯蔵における小胞体機能タンパク質の機能解明とその育種的利用

水稻种子内质网功能蛋白在细胞内物质储存中的功能阐明及其在育种中的应用

• 批准号: 19H02933
• 负责人: 熊丸 敏博
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2019-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19H02933/
• 关键词: イネ; オルガネラ; 機能解析; 貯蔵タンパク質; 澱粉; 種子; 突然変異

1、プロラミンの小胞体内への蓄積機構解明esp3 変異は複数のCysR（cysteine rich）プロラミン分子を欠失する。Mutmap法によってESP3候補遺伝子として検出した遺伝子について、サンガー法によって当該候補遺伝子のゲノム塩基配列を解析した。その結果、esp3変異体において当該遺伝子にSNPは認められなかった。そこで、再度MutMap法による連鎖解析を行うためにesp3系統と野生型との交雑F2個体の自殖種子を用いて野生型とesp3ホモF2個体をそれぞれ約30個体選抜した。2、グルテリン前駆体の小胞体からの小胞輸送機構解明グルテリン前駆体を多量に蓄積する突然変異であるGlup1及びglup7の原因遺伝子同定のために、MutMap法を用いて両遺伝子の染色体上の位置を推定した。MutMap法による連鎖解析の結果、Glup1及びglup7において、遺伝子候補領域内に膜交通に関与する因子と輸送小胞の構成因子のそれぞれをコードする遺伝子にSNPが認められた。3、小胞体タンパク質と澱粉合成代謝制御との関連性解明プロラミン分子種の蓄積が変化したesp1、esp3、Esp4変異種子及びグルテリン前駆体を多量に集積するesp2変異種子における澱粉合成関連酵素を解析した。登熟種子から抽出したタンパク質を用いてNative-PAGEによるSS、BE、DBEの活性染色、完熟種子から抽出したタンパク質を用いてSS、BE、ISA、PUL、Pho特異抗体によるウエスタン分析によってタンパク質量を解析した。いずれの系統においても澱粉合成関連酵素の活性と量は野生型と大差なかった。

The へ accumulation mechanism in the プロラ へ <s:1> of the <s:1> small cell explains the variation of esp3 in the <s:1> complex number <e:1> CysR (cysteine rich) プロラ the <s:1> molecule を is deficient in する. Mutmap method に よ っ て ESP3 alternate heritage 伝 son と し て 検 out し た posthumous son 伝 に つ い て, サ ン ガ ー method に よ っ て when the standby heritage 伝 son の ゲ ノ ム salt base with column を parsing し た. Youdaoplaceholder0 そ result, esp3 variant にお て て when the 伝 sub にSNP recognizes められな 伝 った った. そ こ で, again MutMap に よ る chain line analytical を う た め に esp3 system と wild-type と の pay 雑 F2 individuals の を since colonization seeds with い て wild-type と esp3 ホ モ F2 individuals を そ れ ぞ れ about 30 individuals choose sorting し た. Before 2, グ ル テ リ ン 駆 body の small cell body か ら の vesicular transport agencies interpret グ ル テ リ ン 駆 を に abundant accumulation body before す る suddenly - different で あ る Glup1 and び glup7 の reason but 伝 child be の た め に, MutMap を with い て struck heritage 伝 の の locus on a chromosome location を presumption し た. MutMap method に よ る chain analytic の results, Glup1 and び glup7 に お い て に membrane transport, but 伝 alternate field に masato and す る factor と conveying small cell の factor の そ れ ぞ れ を コ ー ド す る heritage 伝 son に SNP が recognize め ら れ た. 3, small cell body タ ン パ ク qualitative と starch synthesis metabolic suppression と の masato even sex interpret プ ロ ラ ミ ン accumulation of molecules of の が variations change し た esp1, esp3, Esp4 - different seeds and び グ ル テ リ ン 駆 body before を に set product abundant す る esp2 - different seed に お け る starch synthesis masato even enzyme を parsing し た. Deng cooked seeds か ら spare し た タ ン パ ク qualitative を with い て Native - PAGE に よ る SS, BE, DBE の reactive dyeing, full ripeness seed か ら spare し た タ ン パ ク qualitative を with い て SS, BE, ISA, PUL, Pho specific antibodies に よ る ウ エ ス タ ン analysis に よ っ て タ ン パ ク quality を parsing し た. The と amount of <s:1> wild-type と large difference of な な った った in the ずれ system of にお て て て と in the <s:1> activity of enzymes related to starch synthesis と amount of <s:1> wild-type と.

项目成果

難消化性澱粉を保有するイネ澱粉構造変異系統の胚乳特性解析

抗性淀粉水稻淀粉结构突变系胚乳特性分析

• 发表时间: 2019
• 作者: 和田卓也;松島良;藤田直子;三浦聡子;クロフツ尚子;保坂優子;永松志郎;熊丸敏博
• 通讯作者: 熊丸敏博

Serine hydroxymethyltransferase (SHMT)はイネ種子のシステイン高含有貯蔵タンパク質の合成に関与する

丝氨酸羟甲基转移酶（SHMT）参与水稻种子中富含半胱氨酸的储存蛋白的合成。

• 发表时间: 2021
• 作者: Tian L;Chou HL;Fukuda M;Kumamaru T;Okita TW.;福田真子，松坂弘明，長嶺愛，熊丸敏博
• 通讯作者: 福田真子，松坂弘明，長嶺愛，熊丸敏博

イネのTILLING 変異系統を用いたOsHKT1;4 Na+ 輸送体の塩ストレス下における生理機能の解明

利用水稻 TILLING 突变系阐明盐胁迫下 OsHKT1;4 Na+ 转运蛋白的生理功能

• 发表时间: 2020
• 作者: Tian L;Chou HL;Fukuda M;Kumamaru T;Okita TW.;福田真子，松坂弘明，長嶺愛，熊丸敏博;河村敏貴，小林奈通子，グエンタンハオ，石川亮，且原真木，田野井慶太朗，松坂弘明，熊丸敏博
• 通讯作者: 河村敏貴，小林奈通子，グエンタンハオ，石川亮，且原真木，田野井慶太朗，松坂弘明，熊丸敏博

九州大学研究者情報（熊丸敏博）

九州大学研究员信息（Toshihiro Kumamaru）

Golgi Transport 1 (GOT1B)は貯蔵タンパク質RNAの特定小胞体領域への局在及びグルテリンとα-グロブリンの小胞体からの効率的な輸送に必要である

高尔基体转运 1 (GOT1B) 是存储蛋白 RNA 定位到特定内质网区域以及从内质网有效转运谷蛋白和 α-球蛋白所必需的。

• 发表时间: 2020
• 作者: Tian L;Chou HL;Fukuda M;Kumamaru T;Okita TW.;福田真子，松坂弘明，長嶺愛，熊丸敏博;河村敏貴，小林奈通子，グエンタンハオ，石川亮，且原真木，田野井慶太朗，松坂弘明，熊丸敏博;福田真子，熊丸敏博，Thomas W. Okita
• 通讯作者: 福田真子，熊丸敏博，Thomas W. Okita