Development of a high-pressure freeze trap method of protein crystals

蛋白质晶体高压冷冻捕获方法的开发

• 批准号: 24657071
• 负责人: WATANABE Nobuhisa
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24657071/
• 关键词: 高圧結晶構造解析; ダイヤモンドアンビルセル

X-ray radiation damage is a serious problem for the high-pressure protein crystallography, because the method uses a diamond anvil cell and it is necessary to perform experiments at room temperature. In this study, we have tried to develop a new method that makes protein crystals frozen under high-pressure condition. A new apparatus has been developed. However, we found the mother liquid oozes from the crystal when we pressurize protein crystals, and that degrades crystal quality during the freezing process. We could not find a workaround for this problem.

X射线辐射损伤是高压蛋白质晶体学的一个严重问题，因为该方法使用金刚石对顶砧，并且需要在室温下进行实验。本研究尝试发展一种在高压条件下冷冻蛋白质晶体的新方法。一种新仪器已经研制出来了。然而，我们发现当我们对蛋白质晶体加压时，母液从晶体中渗出，并且在冷冻过程中降低晶体质量。我们无法找到解决此问题的方法。

项目成果

加圧による3-イソプロピルリンゴ酸脱水素酵素への水分子の侵入： 深海微生物の酵素の圧力適応

压力诱导水分子进入3-异丙基苹果酸脱氢酶：深海微生物酶的压力适应

• 发表时间: 2012
• 作者: T Nagae;Y. Hamajima;T. Kawamura;K. Niwa;M. Hasegawa;C. Kato;N. Watanabe;永江峰幸，濱島祐輝，河村高志，丹羽健，長谷川正，加藤千明，渡邉信久
• 通讯作者: 永江峰幸，濱島祐輝，河村高志，丹羽健，長谷川正，加藤千明，渡邉信久

蛋白質結晶の高圧状態凍結トラップ法の開発

蛋白质晶体高压冷冻捕获方法的开发

• 发表时间: 2013
• 作者: 丹羽達也;田口 英樹;渡邉信久,永江峰幸
• 通讯作者: 渡邉信久,永江峰幸

加圧による3-イソプロピルリンゴ酸脱水素酵素への水分子の侵入 : 深海微生物の酵素の圧力適応

压力诱导水分子进入 3-异丙基苹果酸脱氢酶：深海微生物酶的压力适应

• 发表时间: 2012
• 作者: 丹羽達也;田口 英樹;渡邉信久,永江峰幸;永江峰幸,濱島祐輝,河村高志,丹羽健,長谷川正,加藤千明,渡邉信久
• 通讯作者: 永江峰幸,濱島祐輝,河村高志,丹羽健,長谷川正,加藤千明,渡邉信久

High-pressure-induced water penetration into IPMDH and pressure-adaptation mechanism of the proteins from deep-sea bacteria

高压水对IPMDH的渗透及深海细菌蛋白质的压力适应机制

• 发表时间: 2012
• 作者: T Nagae;Y. Hamajima;T. Kawamura;K. Niwa;M. Hasegawa;C. Kato;N. Watanabe
• 通讯作者: N. Watanabe