骨芽細胞シートと人工類骨を用いた骨基質石灰化の解明と骨形成促進技術への展開

利用成骨细胞片和人工骨样阐明骨基质矿化以及促进骨形成技术的开发

• 批准号: 25670848
• 负责人: 小松 紀子
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2014-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-25670848/
• 关键词: 骨芽細胞; 人工類骨; 石灰化

顎・顔面の正確かつ機能的な再生・再建技術の向上には骨形成促進が必要であり、これを実現するためには骨の力学的基盤となる骨基質石灰化の機序を解明することが極めて重要となる。我々は骨芽細胞によるリン酸輸送、及びイオン変化に伴う骨基質有機成分のメッシュワーク破綻がごく局所的なリン酸の押し上げ（マイクロ・ブースト）を惹起し、結晶析出が進行すると考えた。本研究の目的は、独自に開発した骨芽細胞シートと人工類骨を用いてリン酸マイクロ・ブーストを実証して骨石灰化機序を解明し、口腔外科学の技術向上の一助とすることである。そのため平成25年度は以下の研究をおこなった。（１）人工類骨作製条件の検討：synthetic cartilage lymphの条件を参考に調製した合成細胞外液にウシI型コラーゲンと合成ヒトデコリンを混和し、37℃で培養した。このとき混和するコラーゲン、デコリンの各濃度および合成細胞外液中のリン酸濃度の条件をふって試験をおこなった。0、6、24、72、144時間で析出した無機結晶を採取し、析出した結晶の重量、組成、カルシウムおよびリンの含有量について評価をおこなった。（２）骨芽細胞シートの作製条件の検討：MC3T3-E1細胞を孔径0.4 μmメンブレン膜を持つトランスウェル上に播種し、10%FBS含有αMEM培地で7日間培養し骨芽細胞シートを作製した。このとき播種する細胞数をふって試験をおこなった。膜抵抗測定機を用いて作製したシートの細胞密集度を定量評価し、FITC-デキストランを用いてシートの高分子不透過性を評価した。

It is important to understand the mechanism of bone matrix calcification in order to promote bone formation in the correct function of jaw and facial reconstruction. In addition, the bone marrow cells were exposed to acid transport and crystallization, which was accompanied by the formation of organic components in bone matrix. The aim of this study is to develop the mechanism of bone calcification and to provide a technical basis for oral surgery. 25 years of research below. (1) Artificial osteoid production conditions: synthetic cartilage lymph conditions reference preparation of synthetic extracellular fluid, its type I temperature, synthetic temperature, mixed culture at 37℃. The concentration of the compound and the concentration of the compound in the extracellular fluid were determined. 0, 6, 24, 72, 144 time for precipitation of inorganic crystals, precipitation of crystal weight, composition, composition, and content (2) Study on the conditions for the production of bone bud cells: MC3T3-E1 cells with pore size of 0.4 μm and membrane membrane were cultured in 10% FBS containing αMEM for 7 days. The number of cells in the seed was increased. The membrane resistance analyzer was used to quantitatively evaluate the cell density and polymer impermeability of FITC.

项目成果

Fabrication of Stereotyped Beta-Tricalcium-Phosphate Blocks into a Conjugated Structure using Mesenchymal Stem Cell Sheets Prepared in Temperature-Responsive Culture Dishes

使用温度响应培养皿中制备的间充质干细胞片将定型 β-磷酸三钙块制造成共轭结构

• 期刊: J of Hard Tissue Biology
• 作者: Mori Y;Fujihara Y;Misawa M;Inoue H;Inaki R;Suenaga H;Okubo K;Saijo H;Takato T;Hoshi K.
• 通讯作者: Hoshi K.

新たな顎骨および軟骨再建技術の開発

开发新的颌骨和软骨重建技术

• 发表时间: 2013
• 作者: Mori Y;F. Y.;Misawa M;Inoue H;Inaki R;Suenaga H;Okubo K;Saijo H; Takato T and Hoshi K;髙戸毅
• 通讯作者: 髙戸毅