酵素を利用した効率的チーズ製造システムの確立

利用酶建立高效的奶酪制造系统

• 批准号: 61860011
• 负责人: 上野川 修一
• 金额: $ 3.14万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-61860011/
• 关键词: ゴーダチーズ; 乳酸菌; プロテアーゼ

ゴーダタイプのチーズを製造し、熟成期間の異なるチーズより水溶性の画分を調製した。この画分を逆相カラムを用いたHPLCで分画し、得られた主要ペプチド画分のアミノ酸配列を推定した。熟成期間が異なっても、常に【αs_1】-カゼインのN末端から、1〜9,1〜13,1〜14に相当するペプチが主要な成分であった。さらにこれらペプチドの由来を調べるため、【αs_1】-カゼインのN末端の1〜23のペプチドを基質とし、これにチーズスターターとして用いられている異なる菌株の乳酸菌を作用させたところ、どの菌株にもこのペプチドを分解し、上記ペプチドを遊離するプロティナーゼ活性が見出された。つぎに、この活性をもつ酵素の精製を試みたた。基質には上記した【αs_1】-カゼインのN末端1〜23残基に相当するペプチドを用い、酵素活性はこのペプチドの分解量の減少をHPLCで測定することで決定した。その結果、乳酸菌体中には、2種類のチーズ熟成中のペプチド生成に関与する酵素が存在することが明らかとなり、またいずれの酵素も単一なまでに精製することに成功した。それぞれをLEP【I】,LEP【II】と名付けた。LEP【I】の分子量は98000,最適PHは7,0であり、その活性金属イオンキレート剤で阻害されたことから、活性中心には金属が存在するものと考えられた。LEP【I】の基質特異性はユニークで、Glu-Asnのペプチド結合に対して高い親和性を示すと同時に分子量3000以上のペプチドのペプチド結合は切断しなかった。LEP【II】は、分子量が8000で、LEP【I】と同様に活性中心に金属を配するメタルプロティナーゼであった。この酵素もLEP【I】と同様に分子量4000以上のペプチドを分解しない、いわゆる基質のサイズを認識する新しいタイプの酵素であった。さらに、各種菌株を用いて、ゴーダタイプチーズを製造し、それぞれの風味と上記ペプチドの生成との関連について研究を行なった。

The production and ripening period are different from each other. This analysis was performed using HPLC to determine the main components and acid sequences. Ripening period is different, often [αs_1]-N terminal, 1 ~ 9, 1 ~ 13, 1 ~ 14, corresponding to the main components. In addition, the origin of the protein is regulated, and [αs_1]-the N-terminal of the protein is selected from 1 to 23 of the substrate, and the protein is selected from 1 to 23 of the N-terminal of the protein.つぎに、この活性をもつ酵素の精制を试みたた。The matrix was determined by HPLC for the determination of the activity of the enzyme and the reduction of the amount of degradation of the N-terminal residues 1 - 23 of the matrix. As a result, two kinds of lactic acid bacteria are produced in the process of fermentation. LEP [I],LEP [II],LEP [II]. The molecular weight of LEP [I] is 98000, the optimum pH is 7,0, and the active metal is present. The substrate specificity of LEP [I] is shown by the high affinity of Glu-Asn binding and the cleavage of Glu-Asn binding for molecular weights above 3000. LEP [II] has a molecular weight of 8000 and LEP [I] has the same active center as metal. The enzyme LEP [I] and the enzyme with molecular weight above 4000 can be decomposed and recognized as a new enzyme. In addition, various strains are used in the production, flavor and production of various strains.

项目成果

S.Kaminogawa: J.Food Sci.51. 1253-1256 (1986)

S.Kaminokawa：J.Food Sci.51。

T.R.Yan: Evr.J.Biochem. (1987)

T.R.Yan：Evr.J.Biochem。