Mechanisms of polarity acquisition in the auditory hair cells

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内耳は蝸牛、半規管、および平衡斑からなり、それぞれには有毛細胞、支持細胞などを含む感覚上皮が存在する。成熟した有毛細胞では、細胞頂部のキノシリアが一端に局在し、階段状のステレオシリアがキノシリアに連なるように細胞内極性を形成する。我々は以前の報告で、摘出卵形嚢でのライブイメージングにより極性の形成過程を詳細に観察することに成功した。以前、我々は卵形嚢ではキノシリアおよびmother centriole (MC)が一端に移動する際にdaughter centriole (DC)の末梢側への移動が先行することを報告した。また、極性反転線の内側と外側の有毛細胞でキノシリアの移動様式に差異はみられなかった。これを今度は卵形嚢ではなく蝸牛で観察することで極性の形成過程に卵形嚢との間で違いがあるか、また内外有毛細胞での極性形成に違いがあるかを確認することが目標である。2022年度は、今回の研究に関する2年目であり、2021年度（初年度）Atoh1 Cre; Rosa tdTomatoおよびGFP-Centrin2マウスを入手するため、マウスを保有しているNIH、およびマウス供出元であるJackson laboratoryとMTAの契約を取り交わしていた。京都大学の動物実験施設にて、米国から送付された凍結精子から人工授精を行い、ヘテロマウスを入手した。その後、マウスの交配を行っており、Atoh1 Cre; Rosa tdTomato/Rosa tdTomatoマウス、およびGFP-Centrin2/GFP-Centrin2のマウスを確保するべく交配を進めている。一旦実験に必要なマウスが樹立されたが、また子孫を残せず、またWTのマウスと掛け合わせてマウス交配を進めている。また、E14.5-E15.5のマウスの蝸牛剖出および培養方法を検討している最中である。