小胞体ストレス軽減鶏の耐暑熱メカニズム解明と有用資源探索

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本申請課題では、小胞体ストレスと暑熱下における体温調節との関連性を明らかにし、熱射病発生を低減可能な飼料管理を実現するため、以下の２つの課題を追究している。①暑熱下のブロイラーにおいて小胞体ストレスがどのように体温調節に影響したのか機序の解明および、②小胞体ストレス軽減効果のある資源の探索。①に関して：ブロイラーを対照区、小胞体ストレス軽減区（4-PBA区、TUDCA区）の3区に分け、4-PBA区、TUDCA区のニワトリには暑熱曝露前の10日間においてそれぞれの化合物を飼料中に添加し給与した。36℃の暑熱ストレスに48時間曝露したすべてのニワトリで、体温の上昇が確認されたが、4-PBA区でわずかに体温抑制効果が認められた。このことは過去に得られた急性暑熱曝露データを再現するものであった。一方、熱産生・放熱にかかわると考えられる項目（採食量・飲水・排泄量）に差はみられなかった。それぞれのニワトリから組織（脳・腸上皮・骨格筋）を採取し、今後遺伝子解析実験に供する予定である。②に関して：培養ニワトリ胚線維芽細胞の培養系を確立し、さらに熱ストレス誘導性小胞体ストレスを検知可能なレポーターシステムを構築完了した。このシステムはGRP78遺伝子のプロモーター領域を使用しており、小胞体ストレス存在下で発光し、小胞体ストレス度合いを定量可能であることが明らかになった。一方で、急性暑熱化のニワトリ体温に近い44℃の温度条件下においては、通常のルシフェラーゼが機能しないことが明らかとなったので、新たに構築し直した熱耐性の高いルシフェラーゼシステムを用いて、今後スクリーニングを行っていく。