Tet2変異によるクローン性造血と造血器腫瘍発症機構の解明

阐明Tet2突变引起的克隆造血和造血肿瘤发生的机制

• 批准号: 22K16314
• 负责人: 宮井 優里奈
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-22K16314/
• 关键词: TET2; CHIP; DNAメチル化; クローン性造血

本研究では、DNA脱メチル化酵素TET2欠損によって加齢性に増殖した前駆細胞集団の性質および遺伝子発現制御機構の変化を明らかにすること、さらに、当該細胞群の異常増殖による造血器腫瘍発症への寄与を明らかにすることを目的としている。本年は、TET2欠損マウスの単細胞トランスクリプトーム解析により見出した、加齢性に増加する腫瘍クローンと考えられるCD62L+細胞の性質と機能の解析を中心に研究を遂行した。(1)CD62L+細胞の性質に関する解析TET2欠損マウス由来のCD62L+細胞の分化能を調べるために、フローサイトメトリーにより当該細胞群を単離し、コロニー形成細胞アッセイを行った。野生型マウス由来のCD62L+細胞に比べて、TET2欠損マウス由来のCD62L+細胞ではCFU-GMへの分化が亢進し、一方でCFU-Gへ分化する細胞の割合が減少していた。さらに、トランスクリプトーム解析を元に、受容体の遺伝子発現を精査し、TET2欠損マウス由来のCD62L+細胞で高発現する受容体を明らかにした。この受容体に対するリガンドを用いて培養を行ったところ、野生型マウス由来の当該細胞群に比べて細胞増殖の亢進が認められた。(2)CD62L+細胞の病態への寄与放射線照射マウスに、TET2欠損マウスから単離したCD62L+細胞を移植し、動態解析を行った。移植後のマウスの各組織から細胞を単離し、フローサイトメトリーにより解析を行ったところ、移植したCD62L+細胞由来の細胞群は特に肺に移行し分化することが明らかになった。さらに、移行後のTET2欠損マウス由来のCD62L＋細胞では、野生型マウス由来のものに比べて分化後の細胞の形態および増殖に差が認められた。今後、移植後のマウスについて、造血器腫瘍に関わる病態が確認できるのか精査したい。

The purpose of this study is to clarify the nature of the pre-existing cell population and the mechanism of gene expression control in the presence of DNA depolymerase TET2 deficiency, and to clarify the development of hematopoietic tumors when the abnormal proliferation of this cell population occurs. This year, the analysis of the properties and functions of CD62L + cells was carried out in the center of TET2 deficiency. (1) Analysis of CD62L + cell properties related to TET2 deficiency causes CD62L + cell differentiation to modulate its ability to differentiate when the cell population is isolated and forms cell differentiation. CD62L + cells derived from wild-type cells are more differentiated than CD62L + cells derived from TET2-deficient cells, and CFU-GM cells are more differentiated than CD62L + cells derived from TET2-deficient cells. In this paper, the analysis of cell types, receptor gene expression, TET2 deficiency, CD62L + cells and receptor gene expression are discussed. The receptor is isolated from the wild type and is recognized as a hypertrophic cell population. (2) Pathological changes of CD62L + cells and radiation exposure, TET2 damage, cell separation, CD62L + cell transplantation, dynamic analysis. After transplantation, the cells in each tissue were isolated and analyzed, and the cell population from which CD62L + cells were transplanted was specially differentiated and migrated. CD62L + cells derived from TET2 deficient cells were identified by morphological and reproductive differences between TET2 deficient cells derived from TET2 deficient cells and TET2 wild cells. In the future, after transplantation, the disease related to hematopoiesis will be confirmed.

项目成果

Novel cell fraction of myeloid leukemia in Tet2-deficient mice discovered by single-cell analysis

单细胞分析发现 Tet2 缺陷小鼠中髓系白血病的新细胞组分

• 发表时间: 2022
• 作者: Iwasaki Takeshi;Watanabe Ryu;Ito Hiromu;Fujii Takayuki;Okuma Kenji;Oku Takuma;Hirayama Yoshitaka;Ohmura Koichiro;Murata Koichi;Murakami Kosaku;Yoshitomi Hiroyuki;Tanaka Masao;Matsuda Shuichi;Matsuda Fumihiko;Morinobu Akio;Hashimoto Motomu;Takayuki Fujii;Yurina Miyajima
• 通讯作者: Yurina Miyajima