マクロライド系移植免疫抑制剤の線維芽細胞のTGF-β,CTGF産生に対する影響

大环内酯类移植免疫抑制剂对成纤维细胞生成TGF-β和CTGF的影响

• 批准号: 10770420
• 负责人: 山田 朋子
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-10770420/
• 关键词: FK506; TGFβ; 線維芽細胞; 膠原線維

今回はFK506,tranilastの線維芽細胞の増殖に対する影響をELISAキットで測定したものである。繊維芽細胞は新生児包皮由来のもので,継代3代目のものを使用した。また,内皮細胞(HUVEC)を用いて同様の実験を行った。(詳細な実験内容)96穴dishに10^5/wellの線維芽細胞を播種した。培地は10%DMEM培地に10%FCSを添加したものを使用した。それに更にFK506,tranilast,hydrocortisoneなどの薬剤を加え,各well計100μlにして2日間培養を行い,その後,BrdUを用いたCell proliferation ELISA kitを用いて,各種薬剤の細胞増殖に対する影響の比較を行った。各種薬剤の濃度は,FK506,hydrocortisoneは10^<-6>M,10^<-7>M,10^<-8>M,10^<-9>M,10^<-10>M,tranilastは0.05mg/ml,0.1mg/ml,0.2mg/mlである。またBrdUを加えて培養した時間は2時間である。同様の実験を内皮細胞(HUVEC)を用いて行った。結果のまとめ1:FK506では,10^<-7>M以下では,ほとんど対照と変わりがみられなかったが,10^<-6>Mでは,やや対照と比べて,繊維芽細胞の増殖抑制がみられたが,有意差はなかった。内皮細胞では10^<-6>においても対照と差がみられなかった。2:tranilastでは,線維芽細胞,内皮細胞ともに,0.1mg/mlで有意に細胞増殖抑制がみられた。今回はTGFβやCTGF産生の検討を行うに至っていないが,今後も検討を続けていく。また,FK506のみでなく,tranilastについても検討を行っていく予定である。

The effect of FK506,tranilast on cell proliferation was determined by ELISA. The embryonic cells were used in the third generation of newborn prepuce. The endothelial cells (HUVEC) are used in the same way. 96-hole dish 10^5/well and line cells seeded. 10% DMEM is added to the culture medium. In addition, 100μl of FK506, transit and hydrocortisone were added to each well during 2 days of culture. After that,BrdU was used in the Cell proliferation ELISA kit to compare the effects of various agents on cell proliferation. The concentration of various substances is FK506,hydrocortisone is 10 <-6>^M, <-7>10 <-8>^<-9><-10>M, transit is 0.05mg/ml, 0.1mg/ml, 0.2mg/ml. BrdU The endothelial cells (HUVECs) are also used in the treatment of cancer. Results: FK506, 10 ^ M, 10 <-7>^ M, 10 ^ M, <-6>10 Endothelial cells are 10 minutes away from each other<-6>. 2:tranilast, vascular germ cells, endothelial cells, 0.1mg/ml, intentional cell proliferation inhibition. Now, the research on TGFβ and CTGF production has been carried out, and in the future, the research will be carried out.また,FK506のみでなく,tranilastについても検讨を行っていく予定である。