音響障害における内耳グルタミン酸毒性に関する基礎的研究
声学疾病内耳谷氨酸毒性的基础研究
基本信息
- 批准号:12770973
- 负责人:
- 金额:$ 1.6万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2001
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
音響外傷性難聴では巨大音の曝露や持続的騒音により、難聴は不可逆的となることが知られている。1994年、Pujolらが音響外傷性難聴をおこした動物における蝸牛の形態変化が、蝸牛に直接グルタミン酸を投与した場合と類似することを報告して以来、蝸牛の求心性神経伝達物質であるグルタミン酸による興奮性神経毒性(Exciteneurotoxity)の、音響外傷性難聴への関与が注目されている。しかし実際に音響暴露時に過剰のグルタミン酸が蝸牛内に放出され、それが神経毒性に作用しているかについては現在まで全く研究されていない。今回、遺伝子操作技術によるグルタミン酸トランスポーター欠損マウスを用いることにより、巨大音暴露後のノックアウトマウスの蝸牛外リンパ中におけるグルタミン酸動態を測定し、生理的、形態的変化を詳細に観察することにより、騒音性難聴の機序を明らかにした。申請者はH12年度、GLASTノックアウトマウスに混合ガスにより全身麻酔を施した後、8000Hz、120dBの音響負荷を60分間行い音響負荷後、急性期における蝸電活動電位測定装置を用いた聴力の変化、微小透析法を用いた蝸牛外リンパ液中のグルタミン酸濃度の測定、また電子顕微鏡を用いた蝸牛形態的変化の観察を行った結果、騒音性難聴におけるGLASTのグルタミン酸神経毒性の抑制効果について明らかにした。さらにH13年度は、毎日60分間の8000Hz、120dBの音響負荷を7〜14日間連続で行い、長期間の音響負荷による有毛細胞の変化についての研究を行った。有毛細胞の脱落数については蝸牛骨胞を摘出し、4%パラホルムアルデヒドによる蝸牛環流固定後、サーフェス・プレパレーションにて各回転のコルチ器を採取した後にロダミンパロイジンにて聴毛を染色し、ヘキスト33342にて核の二重染色を行い、蛍光顕微鏡にて脱落細胞のカウントを行う。ヘキスト33342による核の染色により、核のアポトーシス様の形態変化を起こした細胞の割合を算出し、長期音響負荷による有毛細胞障害の詳細な観察を行った。また、この時音響負荷前にグルタミン酸拮抗剤である6-7-dinitroquinoxalinc-2,3-dione (DNQX)の蝸牛内注入を行い、グルタミン酸拮抗剤による長期音響負荷による有毛細胞障害抑制効果の観察の結果、グルタミン酸拮抗剤による音響障害抑制効果も確認された。
The acoustic traumatic difficulty is caused by the exposure of loud sounds and persistent sounds, and the difficulty is caused by the irreversible In 1994, Pujol reported that the morphological changes of snails, snails, and other animals caused by acoustic trauma were similar to those caused by direct acid injection. Since then, the relationship between the excitotoxicity and acoustic trauma of snails and the concentration of substances in the brain has been discussed. In fact, during sound exposure, the release of acid from snails and the effects of neurotoxicity have been fully studied. In this paper, the author analyzes the mechanism of the change of the physiological and morphological changes of the acid in detail after the exposure of the large sound. Applicants H12 years, GLAST, 120dB sound load, 8000Hz, 60 minutes sound load, acute phase, cochlear electrical activity potential measurement device, application of microdialysis method, determination of acid concentration in snail fluid, application of electron microscope, observation of snail morphology, GLAST'S INHIBITION OF ACIDIC NEUROTOXICITY In H13, the acoustic load of 8000Hz and 120dB for 60 minutes per day is continuously carried out from 7 to 14 days, and the acoustic load of hairy cells is changed for a long time. The number of hair cells dropped from the snail bone cells was extracted, 4% of them were removed from the snail bone cells. After the snail current was fixed, the hair cells were stained, and the nuclei were stained with double staining. The hair cells were removed from the snail bone cells by light microscopy. The nuclear staining, morphological changes of the nucleus and the long-term acoustic load of the hairy cells were calculated. Results of observation and confirmation of hairy cell damage inhibition effect of 6-7-dinitroquinoxalinc-2,3-dione (DNQX) injected into snail before acoustic loading, and of hairy cell damage inhibition effect of 6 - 7-dinitroquinoxalinc-2,3-dione (DNQX) injected into snail before acoustic loading.
项目成果
期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
N.Hakuba,K.Koga,K.Gyo,S.Usami,K.Tanaka: "Exacerbation of noise-induced hearing loss in mice lacking the glutamate transporter GLAST."The journal of Neuroscience. 20(23). 8750-8753 (2000)
N.Hakuba、K.Koga、K.Gyo、S.Usami、K.Tanaka:“缺乏谷氨酸转运蛋白 GLAST 的小鼠噪音引起的听力损失加剧。”神经科学杂志。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Hakuba N: "Exacerbation of noise-induced hearing loss in t mice lacking the glutamate transporter GNAST"Journal of Neuroscience. 20. 8750-8753 (2000)
Hakuba N:“缺乏谷氨酸转运蛋白 GNAST 的 t 小鼠中噪声引起的听力损失加剧”神经科学杂志。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
白馬伸洋: "グルタミン酸トランスポーター欠損マウスにおける音響障害"Otol Jpn. 11. 103-107 (2001)
Nobuhiro Hakuba:“谷氨酸转运蛋白缺陷小鼠的声学损伤”Otol Jpn. 11. 103-107 (2001)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
白馬伸洋,古賀健一郎,渡部太志,兵頭純,谷口昌史,暁清文: "グルタミン酸トランスポーター欠損マウスにおける音響障害"Otology Japan. 11-2. (2001)
Nobuhiro Hakuba、Kenichiro Koga、Futoshi Watanabe、Jun Hyodo、Masashi Taniguchi、Kiyofumi Akira:“谷氨酸转运蛋白缺陷小鼠的声学损伤”Otology Japan (2001)。
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