環状オリゴ糖/デンドリマー結合体を基本骨格とする高機能性遺伝子導入ベクターの構築
以环状寡糖/树枝状大分子缀合物为基本骨架的高功能基因转移载体的构建
基本信息
- 批准号:12771464
- 负责人:
- 金额:$ 1.28万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2001
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
ガラクトシルα-シクロデキストリン(Gal-α-CyD)とGeneration 2のポリアミドアミンデンドリマー(デンドリマー)との結合体(Gal-α-CDE)およびα-シクロデキストリン(α-CyD)とガラクトシル化デンドリマーとの結合体(Gal-DE-α-CyD)を新規に調製するため、その合成法・精製法について検討した。また、これら結合体とプラスミドDNA(pDNA)との複合体形成、アシアロ糖蛋白レセプターを発現するヒト肝癌細胞HepG2細胞におけるレポーター遺伝子(ルシフェラーゼ)の発現効率をガラクトース非修飾デンドリマー/α-CyD結合体の場合と比較検討した。Gal-α-CDEは、Gal-α-CyDをトシル化後、DMSO中でデンドリマーと24時間反応させて合成した。一方、Gal-DE-α-CyDはデンドリマーと乳糖をバッファー(pH7.0)中で10日間反応させた後、トシル化α-CyDとDMSO中で24時間反応させて合成した。これら反応物はゲル濾過、アルコール沈殿、アフィニティークロマトグラフィーにより精製した。NMRスペクトルの結果より、結合体はα-CyDとデンドリマーがモル比1:1で結合していることを確認した。電気泳動法で検討した結果、これらα-CyD結合体とpDNAとの複合体形成能はデンドリマーと同様であった。Gal-α-CDE/pDNA複合体のHepG2細胞におけるレポーター遺伝子の発現は、デンドリマー/pDNA複合体と同程度であったが、Gal-DE-α-CyD/pDNA複合体では増大する傾向が観察された。デンドリマー中のGalの置換度を調節することにより、遺伝子導入効率の増大が示唆された。
The combination of (Gal- α-CyD), (Gal- α-CDE), (Gal-DE- α-CyD), (Gal-DE- α-CyD), and so on. The essence of the synthesis method is the best method. The formation of pDNA complex, the formation of DNA (DNA) complex, the formation of DNA (DNA) complex, the formation of glycoprotein complex (pDNA), the formation of DNA (DNA), the formation of glycoprotein (glycoprotein), the formation of DNA (DNA), the formation of glycoprotein (glycoprotein), the formation of DNA (DNA), the formation of glycoprotein (GPT), the formation of DNA (DNA), the formation of glycoprotein (GPT), the formation of DNA (DNA), the formation of DNA (DNA), the formation of glycoprotein ( After the conversion of Gal- α-CDE and Gal- α-CyD, the synthesis of anti-DNA in DMSO was performed in 24 hours. On the other hand, Gal-DE- α-CyD was used to synthesize lactose lactose after 10 days in pH7.0 and 24 hours in α-CyD DMSO. Don't tell me what you want to do, don't know what to do, don't worry about it, don't worry about it. The results of NMR testing were more accurate than those of 1:1. The results of the combination of α-CyD and combination were significantly higher than those of the combination of the two at 12: 00. The results of the computer swimming test, the combination of α-CyD and the pDNA complex can be used to test the results of the experiment. The Gal- α-CDE/pDNA complex, the HepG2 cell cycle, the Gal-DE- α-CyD/pDNA complex and the Gal-DE- α-CyD/pDNA complex were detected in the same degree. The number of Gal settings in this box indicates that the rate of entry is high and the rate of admission is high.
项目成果
期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- 期刊:
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- 作者:
- 通讯作者:
H.Arima: "Design of potent Phosphorothioate Antisense Oligonucleotides Designed to Human Interleukin 10 Gene and Their Evaluation of Antisense Activity"Pharmaceutical Research. 16(8). 1163-1171 (1999)
H.Arima:“针对人白细胞介素 10 基因设计的有效硫代磷酸酯反义寡核苷酸的设计及其反义活性的评估”药物研究。
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