アンチセンス核酸の表皮抗原提示細胞へのデリバリー法の開発

开发将反义核酸递送至表皮抗原呈递细胞的方法

• 批准号: 09772031
• 负责人: 有馬 英俊
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kumamoto University (1998)Tokyo University of Pharmacy and Life Science (1997)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09772031/
• 关键词: アンチセンス抗原; 経皮デリバリー; 表皮抗原提示細胞; リボソーム; イオンフォレーシス; アンチセンス核酸; リポソーム; イオンフォレ-シス

マウスIL-10mRNAに相補的な配列を有するアンチセンスDNA(AS-D-oligo,AS-S-oligo)の表皮抗原提示細胞への送達性の向上に関する基礎的検討として,ヘアレスマウスの背部皮膚を用いてAS-oligoの皮膚透過性におよぼすイオントフォレーシス(IP)法の影響をinvitroおよびinvivoにおいて検討した.また,IP法はその電気的パターンの違いにより,直流(DC)型,交流型などに分類されるが,本研究では皮膚刺激性が低いパルス脱分極(PDP)型を用いた.Invitro実験:AS-S-oligo単独では全く皮膚に浸透しないのに対して,IPを適用した場合,その電流強度およびAS-oligo添加濃度の増加に従い皮膚浸透性は増大し,0.3mA,6時間通電後の累積皮膚浸透率は約60%を示したまたこのPDP型皮膚透過促進効果はDC型に比べて大きく,PDP型IP法の優れた効果が明らかとなった.しかし,皮膚中においてintactなAS-D-oligoはほとんど認められず,DNaseによる分解が示唆されたが,AS-S-oligoは比較的安定であった.Invivo実験:invitroの結果をよく反映して,IPを適用した場合,その電流強度およびAS-Oligo添加濃度の増加に従い皮膚浸透性は増大した.また,皮膚中にintactなAS-S-Oligoが確認された.また,最近行った予備的検討において,アトピー性皮膚炎モデルマウスNC/Ngaマウスの皮膚中に過剰発現しているIL-10mRNAレベルはAS-S-oligoをIP法で浸透させることにより,顕著に低下させ,AS-S-oligoのアンチセンス効果がinvivoで確認された.以上の知見は,,AS-S-oligoの表皮抗原提示細胞中への効果的なデリバリー法としてPDP型IP法の有用性を示唆するものである.

A basic study of the relationship between the alignment of IL-10mRNA and DNA(AS-D-oligo,AS-S-oligo) epidermal antigens and the up-regulation of cell delivery, and the effects of the invitro and in vivo methods on the skin permeability of AS-oligo in the back of the skin. In this study, the skin irritation of AS-S-oligo was lower than that of PDP type. Intro results showed that AS-S-oligo alone increased the skin permeability with the increase of AS-oligo concentration. When IP was applied, the cumulative skin permeability increased by 0.3 mA. After 6 hours of energization, the cumulative skin permeability increased by about 60%. The skin irritation of PDP type was higher than that of DC type. AS-D-oligo is stable in comparison with DNase.Invivo is stable in comparison with AS-D-oligo. Invivo is stable in comparison with DNase. Invivo is stable in comparison with AS-D-oligo. Invivo is stable in comparison with AS-D-oligo. Invivo is stable in comparison with AS-D-oligo. Intact AS-S-Oligo in the skin is confirmed. IL-10mRNA was detected in the skin by the IP method of AS-S-oligo, and the results of AS-S-oligo were confirmed in vivo. These findings suggest that AS-S-oligo epidermal antigens may be useful in identifying the effects of the PDP-type IP method and in identifying the role of AS-S-oligo in cell culture.