アンチセンス核酸の表皮角化細胞へのデリバリー法の開発

表皮角质形成细胞反义核酸递送方法的开发

• 批准号: 08772147
• 负责人: 有馬 英俊
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08772147/
• 关键词: アンチセンスDNA; 経皮デリバリー; リポソーム; IL-10

1)ヘアレスマウス皮膚透過性ヘアレスマウス摘出皮膚を用いて,アンチセンスDNAの皮膚移行性におよぼすリポソームの表面電荷の影響を検討したところ,アンチセンスDNA単独では全く皮膚への浸透がみられなかったのに対し,リポソームに封入することにより増大し,特に正電荷リポソームにおいてその効果は顕著であった.また,正電荷リポソームはアンチセンスDNAの皮膚滞溜性を増大することが明らかとなった.したがって,正電荷リポソームはアンチセンスDNAの経皮デリバリー用キャリアーとして優れていることが明らかとなった.2)細胞内取り込みおよびアンチセンス効果最近,アトピー性皮膚炎患者の炎症部位ではTh2系が優位であり,その要因として炎症部位における単球細胞からのIL-10の過剰産生が関与していると報告されている.そこで,培養細胞としてマクロファージ様株化細胞RAW264.7を用いて以下の検討を行った.細胞へのアンチセンスDNAの取り込みは,皮膚移行性と同様に,アンチセンスDNA単独では僅かであったのに対し,正荷電のリポソームにおいて約10倍増大した.また,細胞をLPSで刺激後のIL-10産生におよぼすアンチセンスDNAの影響を検討したところ,IL-10mRNAの3′非翻訳領域に対するものが濃度依存的,配列依存的に顕著に抑制した.しかし,アンチセンスDNAを封入したリポソームではアンチセンス効果の増強は見いだされなかった.今後,アンチセンスDNAとリポソームの配合比率など実験条件を変えてアンチセンス効果におよぼす影響について検討を加えて行く予定である.また,リポソーム封入体がアンチセンスDNAの細胞取り込みを著しく増大するにもかかわらず,効果の増強を示さない要因として,細胞取り込み後,ライソゾーム系へ移行し,ほとんどのアンチセンスDNAがターゲットへ結合する前に,分解している可能性も考えられる.そのため,細胞質内へアンチセンスDNAを直接移行させうるような他のキャリアー等についても今後検討を加えて行く予定である.

1) To investigate the effect of surface charge on skin permeability of DNA, especially positive charge, on skin migration of DNA. The positive charge of DNA increases the skin viscosity of DNA. 2) Intracellular samples were obtained for the most recent, most important, inflammatory sites in patients with dermatitis, Th2-related sites, and reports of IL-10 production in isolated cells. The cell culture RAW264.7 was carried out using the following methods. Cell DNA selection is about 10-fold higher than that of skin migration, and cell DNA selection is about 10-fold higher than that of skin migration, and cell DNA selection is about 10-fold higher than that of skin migration. IL-10mRNA production after LPS stimulation is concentration-dependent and sequence-dependent inhibition of IL-10mRNA in the 3′ non-translational domain. The DNA of the virus is encapsulated in a complex system, and the results of the virus are enhanced. In the future, the DNA and DNA mixture ratio will be adjusted according to the actual conditions. In addition, the possibility that the DNA of the isolated DNA will be decomposed before binding to the DNA of the isolated DNA will be examined. In addition, direct migration of DNA from cytoplasm to cytoplasm may be discussed in the future.