LIM-キナーゼ結合因子の同定とアクチン細胞骨格制御における機能解析

LIM激酶结合因子的鉴定及其在肌动蛋白细胞骨架调节中的功能分析

• 批准号: 12780463
• 负责人: 大橋 一正
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780463/
• 关键词: LIMキナーゼ; コフィリン; アクチン; リン酸化

L1Mキナーゼ(LIMK)ファミリーはアクチン脱重合因子であるコフィリンをリン酸化し不活性化することで細胞内アクチン骨格を制御するシグナル分子である。これまでに、LIMK1とGSTの融合蛋白質を動物細胞に大量発現させ、結合蛋白の同定を試みたところ、約55kDaの蛋白質を検出し、これがβ-チューブリンであることを明らかにした。1IMK1の過剰発現により細胞内のチューブリンネットワークに大きな変化は見られなかったが、LIMK1とYFPの融合タンパク質の細胞内動態を観察した結果、LIMK1が局在する細胞内小胞がチューブリンネットワークに沿って輸送されていることが観察された。また、LPA等の刺激依存的にLIMK1の局在する小胞が増加することから、エンドサイトーシスに伴うエンドソームに局在していると推測された。これらの小胞形成はLIMK1のキナーゼ活性の有無に影響されなかった。LIMK1とチューブリンとの相互作用は細胞内局在、輸送のため働いていると考えられる。これとは別に、LIMK1の過剰発現によって誘導されるアクチンの重合構造に特異的なアクチン結合タンパク質を検索した。LIMK1は過剰発現により細胞内でアクチンストレスファイバーの形成、膜blebingを引き起こすことがこれまでに明らかとなっており、細胞内に収縮力を持つアクチン構造の増強に働いていると推測される。これらのアクチン構造の形成に働くアクチン結合・束化タンパク質について検討を行ったところ、LIMK1の過剰発現によってアクチン重合を促進するアクチン結合タンパク質を同定した。このアクチン結合タンパク質について詳細な解析はまだ進んでいないため、細胞の収縮に対して新たな機能を持つ可能性を考え解析を進めている。

L1M (LIMK) is a molecule that controls the intracellular activation of a de-duplication factor. The fusion protein of LIMK1 and GST was found in large quantities in animal cells, and the protein of 55kDa was found in animal cells. 1 IMK1 is detected in the intracellular cell cycle, LIMK1 and YFP are fused in the intracellular cell cycle, and the results show that LIMK1 is detected in the intracellular cell cycle. The stimulus-dependent LIMK1 cells are expected to increase in size and size. The cell formation is limited to the activity of LIMK1. LIMK1: The interaction between the two is intracellular, transport and transport. This is the first time that a person's identity has been established. LIMK1 is expected to be the first to develop a cellular structure, membrane blebing, and the second to develop a cellular contraction force, which is expected to increase the strength of the cellular structure. The formation of the structure of the laser beam, the combination of laser beams, the quality of laser beams, the occurrence of laser beams, the coincidence of laser beams, and the quality of laser beams are determined. This article analyzes the possibility of maintaining the new function of the cell in detail.

项目成果

Wakayama T: "Cloning and characterization of a novel mouse immunoglobulin superfamily gene expressed in early spermatogenic cells"Mol Reprod Dev.. 60巻・2号. 158-164 (2001)

Wakayama T：“在早期生精细胞中表达的新型小鼠免疫球蛋白超家族基因的克隆和表征”Mol Reprod Dev..第 60 卷，第 2 期。158-164 (2001)

Matsui S: "LIM kinase 1 modulates opsonized zymosan-triggered activation of macrophage-like U937 cells. Possible involvement of phosphorylation of cofilin and reorganization of actin cytoskeleton"J Biol Chem.. 277巻・1号. 544-549 (2002)

Matsui S：“LIM 激酶 1 调节调理酶聚糖触发的巨噬细胞样 U937 细胞的激活。可能涉及肌动蛋白丝切蛋白的磷酸化和肌动蛋白细胞骨架的重组”J Biol Chem.. Vol. 277，No. 1. 544-549 (2002) ）

Yanagita M: "Gas6 regulates mesangial cell proliferation through Axl in experimental glomerulonephritis"Am J Pathol.. 158巻・4号. 1423-1432 (2001)

Yanagita M：“Gas6 在实验性肾小球肾炎中通过 Axl 调节系膜细胞增殖”Am J Pathol.. Vol. 158，No. 4. 1423-1432 (2001)

Haruhiko Bito: "A critical role for a Rho-associated kinase, p160ROCK, in determining axon outgrowth in mammalian CNS neurons."Neuron. 26・2. 431-441 (2000)

Haruhiko Bito：“Rho 相关激酶 p160ROCK 在决定哺乳动物 CNS 神经元轴突生长中的关键作用 26·2 (2000)。”

Yoshikazu Ishimoto: "Promotion of the uptake of PS liposomes and apoptotic cells by a product of growth arrest-specific gene, gas6."J.Biochem.(Tokyo). 127・3. 411-417 (2000)

Yoshikazu Ishimoto：“通过生长停滞特异性基因gas6促进PS脂质体和凋亡细胞的摄取。”J.Biochem.（东京）127・3（2000）。