染色体の複製開始を制御する新たな分子機構

控制染色体复制起始的新分子机制

• 批准号: 12780519
• 负责人: 上村 陽一郎
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780519/
• 关键词: 染色体DNA複製; 複製開始反応; DNAポリメラーゼ; Dpb11; Sld5-Psf1-Psf2複合体; 出芽酵母; Cdc45

我々のグループは出芽酵母のDpb11と遺伝学的に相互作用する複数のSld因子を同定している。Dpb11は染色体DNA複製開始の際に、DNAポリメラーゼを複製開始領域にローディングする機能をもつ。現在までの解析から、Sld2、3、4についてもDpb11と密接に関係し、染色体DNA複製に機能することを明らかにしてきた。今年度は、新規の遺伝子である、SLD5の解析を行った。SLD5と遺伝学的に相互作用する因子として、PSF1、2を同定した。Psf1の免疫沈降実験から、これら三者は複合体を形成していた。また、この複合体は細胞周期を通じて安定に存在した。更に、sld5の温度感受性変異では、この複合体の安定性が低下しており、Sld5-Psf1-Psf2の複合体形成がこれらの機能にとって重要であることが示唆された。SLD5、PSF1の温度感受性変異株を用いた解析から、これらの因子が染色体DNA複製に関与していることが示された。染色体DNA複製の反応を大別すると、開始反応と伸長反応に分けられる。開始反応については、Cdc45とクロマチンDNAの結合によって検定できる。psf1-1細胞を非許容温度すると、このCdc45の結合がおこっておらず、少なくとも、この因子が複製開始反応に関与していることが示唆された。更に、Psf1と複製開始領域との結合を調べた結果、この因子はDpb11やPo12同様G1/S期に結合がみられた。Psf1とDpb11の複製開始領域の結合は相互の機能に依存していた。これらの、結果から、Sld5-Psf1-Psf2複合体はG1/S期に、Dpb11と相互作用することで、DNAポリメラーゼεの複製開始点へのローディングを実現するものと予想された。

The interaction between Dpb11 and genetic factors of budding yeast is determined by multiple Sld factors. Dpb11 is a functional marker for DNA replication initiation and replication initiation. Now we can analyze the relationship between Dpb11 and Sld2, 3 and 4, and we can understand the relationship between Dpb11 and chromosome DNA replication. This year, the new rules and regulations of the original son, SLD5 analysis of the line. SLD5 and PSF1 and PSF 2 are the same. Psf1 immune sedimentation is a complex formed by three factors. The complex is stable in the cell cycle. Moreover, the temperature sensitivity of Sld5 varies, and the stability of the complex is low. The formation of Sld5-Psf1-Psf2 complex is important for its function. SLD5, PSF1 temperature sensitive variant of the plant to use analysis, and the factors related to chromosome DNA replication and Chromosome DNA replication begins in reverse, begins in reverse, and elongates in reverse. Start reverse transcription, Cdc45, DNA binding, reverse transcription, reverse transcription. psf1 -1 cells are not allowed to bind to the temperature range, the number of cells, the number of cells, and the number of cells. In addition, Psf1 and Psf2 are the same as the G1/S phase. Psf1 and Dpb11 are functionally dependent on each other for the combination of replication initiation domains. The Sld5-Psf1-Psf2 complex is expected to interact with DNA in the G1/S phase.

项目成果

上村陽一郎: "複製複合体の構築"実験医学. 18・7. 949-956 (2000)

上村阳一郎：“复制复合物的构建”实验医学18・7。

Yoichiro Kamimura: "Sld3, which interacts with Cdc45 (Sld4), functions for chromosomal DNA replication in Saccharomyces cerevisiae"EMBO Journal. 20・8. 2097-2107 (2001)

Yoichiro Kamimura：“Sld3与Cdc45（Sld4）相互作用，在酿酒酵母中发挥染色体DNA复制的作用”EMBO杂志20・8（2001）。

Hiroshi Masumoto: "S-Cdk-dependent phosphorylation of Sld2 essential for chromosomal DNA replication in budding yeast"Nature. 415・6872. 651-655 (2002)

Hiroshi Masumoto：“芽殖酵母中染色体 DNA 复制所必需的 S-Cdk 依赖性磷酸化”《自然》415·6872（2002）。

Yoichiro Kamimura: "Sld3, which interacts with Cdc45(Sld4), functions for chromosomal DNA replication in Saccharomyces cerevisiae."EMBO Journal. (In press).

Yoichiro Kamimura：“Sld3 与 Cdc45(Sld4) 相互作用，在酿酒酵母中发挥染色体 DNA 复制的作用。”EMBO 杂志。