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ホヤ胚の筋肉細胞分化決定機構の解析

海鞘胚胎肌细胞分化决定机制分析

基本信息

批准号：
12780554
负责人：
佐藤ゆたか
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ユウレイボヤ卵を遠心して生じる四種類の卵片のうち、黒卵片と名付けられた卵片には筋分化決定因子や、内胚葉分化あるいは原腸陥入にかかわると因子が含まれている。一方、赤卵片と名付けられた卵片にはこれらの因子は含まれない。昨年度は、上記二つの卵片に含まれるmRNAを用いて作製したサブトラクションライブラリーによって発現クローニングを行い、尾部形成に関わる遺伝子Cs-mep1を同定した。今年度は、より包括的に黒卵片に局在する因子を明らかにするため、両者から未増幅のcDNAプラスミドライブラリーを作製し、EST解析を行った。両者からそれぞれ約1,500程度から5'および3'側のESTを得た。3'ESTを用いてクラスタリングしたところ、黒卵片に有意に局在するクローンが20以上得られた。この中にはWntカスケードの正の制御因子であるCasein kinase IやTCFのco-factorであるALYをコードするクローンがあった。これらをモルフォリノオリゴによって機能阻害すると、内胚葉の分化が阻害された。このことは黒卵片には、内胚葉分化決定因子が局在するという知見に一致する。2.近年、東京工業大学西田助教授らによってマボヤから筋分化決定因子macho-1遺伝子が同定された。本研究ではCiona科の種のホヤから相同遺伝子を単離してその機能の保存性について検証した。その結果、Cionaではマボヤ同様母性mRNAは後極に局在するが、マボヤとは異なり、神経胚期以降に神経系でzygoticな発現が認められた。また、モルフォリノオリゴによる機能阻害実験ではCiona macho-1遺伝子の機能を阻害しても筋肉分化を完全に阻害することはできず、Ciona科のホヤではmacho-1以外にも筋肉細胞分化を制御する母性因子があることが示唆された。

1. The four kinds of egg pieces, namely, the egg pieces, the egg pieces and the egg pieces, are determined by the factors of tendon differentiation and endoderm differentiation. A square, a red egg, a red egg, a red egg. The gene Cs-mep1 was identified as a marker for the formation of the tail. This year, the analysis of EST is carried out in the presence of the gene.両者からそれぞれ约1,500程度から5'および3'侧のESTを得た。3'EST is used for the purpose of obtaining information from above 20. The Casein Kinase I and TCF co-factor are the main factors in the process of production. This is the first time that the plant has been able to function as a barrier to endodermal differentiation. The factors determining the differentiation of embryo and endoembryo are the same. 2. In recent years, Professor Nishida of Tokyo Institute of Technology has been studying the mechanism of differentiation of tendon. This study was conducted to examine the conservation of the species of Ciona family and their genetic diversity. The results, Ciona, are similar to those of maternal mRNA. The function of the Ciona macho-1 gene is blocked, and the differentiation of muscle cells is completely blocked.