モラクセラ・カタラーリスのキノロン系抗菌薬耐性に関わる分子機構の解明

阐明卡他莫拉菌喹诺酮类抗生素耐药性的分子机制

• 批准号: 15H00646
• 负责人: 山田 景土
• 金额: $ 0.26万
• 依托单位: 東京都保健医療公社豊島病院
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15H00646/
• 关键词: Moraxella catarrhalis; キノロン系抗菌薬; キノロン耐性決定領域

Moraxella catarrhalisは呼吸器感染症の主要起炎菌として認識されている。一方でキノロン系抗菌は広域抗菌スペクトルを有し、優れた体内移行性を有する為、臨床現場で使用頻度の高い抗菌薬である。本研究では、M. catarrhalisのキノロン系抗菌薬耐性機構について、未だ不明な点が多いことから、in vitroで作製した耐性株を使用して、キノロン耐性に関わる分子機構の解明を試みた。耐性株はstepwise selectionを用いて作製し、levofloxacinのMIC分布が0.25mg/Lから32mg/Lを示す株を得た(wild type ; 0.032mg/L)。得られた菌株における、キノロン作用標的であるgyrA, gyrB, parCおよびparE遺伝子のオープンリーディングフレーム領域の塩基配列を決定した。高度耐性株では低感受性株(MIC ; 0.25mg/L)と比べ変異の数が多く確認された。作製した変異株では標的遺伝子内に、今までに報告されていない7か所の遺伝子変異または塩基の挿入が起きていることが確認された。それらの変異のうち、低感受性株ではgyrB遺伝子に最初の遺伝子変異が起こっていた。それぞれの変異遺伝子を形質転換実験により、標準菌株に導入した結果、一つの遺伝子変異のみで著しくキノロンMICが上昇する変異は確認されなかった。また、gyrA遺伝子においてのキノロン耐性決定領域から著しく離れた領域へのコドンの挿入が軽微なMIC上昇に関与していることが確認された。今後は遺伝子変異のみで説明出来ないlevofloxacinのMIC上昇について、抗菌薬の膜透過性などを評価する目的で、膜タンパク質プロファイルなどを実施し、更なる解析を実施していく予定である。

Moraxella catarrhalis is a respiratory infection that is mainly caused by inflammatory bacteria and is well known. It is an antibacterial agent that has a wide range of antibacterial properties, has excellent in vivo migration properties, and is an antibacterial agent with high frequency of use in clinical sites. This study is based on the antimicrobial resistance mechanism of M. catarrhalis and the unknown point of M. catarrhalis, in In vitro したresistant strains are produced using して, and the キノロンresistant に关わる molecular structure is explained by the test みた. The resistant strain was selected stepwise and the MIC distribution of levofloxacin was 0.25mg/L and 32mg/L was selected (wild type; 0.032mg/L). Obtained られた strain における, キノロン target であるgyrA, gyrB, parCおよびparE伝子のオープンリーディングフレーム区の塩综合arrayをdeterminationした. Highly resistant strains and low-susceptible strains (MIC; 0.25mg/L) are confirmed by the number of strains that are different from each other. The report of した変different strains of ではlabeled by the remaining しまでに and the current までにされていない7かSOの伝子変义または塩基のINSERT が出きていることが CONfirm された.それらの変different のうち, low susceptibility strain ではgyrB 伝子にInitially の缝子変different が起こっていた.それぞれの変variant 伝子をmorphological transformation 実験により, standard strain に introduction した results, 一つの缝子変义のみで出しくキノロンMICがRISEする変differentはconfirmされなかった.また、gyrA缝子においてのキノロンPatience determines the fieldから出しく里れた collar Domain へのコドンのinsert が軽微なMIC rise に关 and していることがconfirm された. From now on, we will explain the MIC rise of levofloxacin and the membrane permeability of antibacterial drugs.などをreview価するpurposeで, filmタンパク性プロファイルなどを実时し, and more なるANALYSIS を実时していく为定である.