播種性血管内凝固症候群患者におけるリコンビナントトロンボモジュリン体内動態の解明

阐明重组血栓调节蛋白在弥散性血管内凝血综合征患者中的药代动力学

基本信息

  • 批准号:
    16H00513
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
  • 财政年份:
    2016
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2016 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究の目的は、播種性凝固血管内症候群(DIC)の治療薬であるリコンビナントトロンボモジュリン(TM-α)の個体差要因を解明することである。TM-αは生体内で切断されると考えられており、切断様式に病態や重症度による差異があると考え、本研究ではTM-αの切断様式を解明することを目的として研究を開始した。TM-αに対して免疫沈降を行うため、市場で販売されている抗ヒトリコンビナントトロンボモジュリンポリクローナル抗体を購入し、TM-αの標品を用いて免疫沈降法を行った。しかしながら、免疫沈降できなかったため、TM-αに対するウサギポリクローナル抗体を作成した。作成した抗体を用いてTM-αの標品を免疫沈降し、Sodium dodecyl sulfate-ポリアクリルアミドゲル電気泳動法(SDS-PAGE)を行い、65 kDa付近にTM-αのバンドを確認した。TM-αが投与されたヒト血漿を検体として、抗TM-αポリクローナル抗体を用いて免疫沈降を行いSDS-PAGEを行ったところ、TM-α以外のバンドを検出した。これらのバンドのうち、分子量が小さい位置に見られたバンドは、TM-αの分解産物や相互作用しているタンパク質と考えられた。また、TM-αよりも分子量が大きい位置にみられたバンドは、TM-αと相互作用しているタンパク質と考えられた。今後は、これらのタンパク質を液体クロマトグラフィータンデム質量分析法により解析することで、TM-αの切断様式や相互作用しているタンパク質を同定していく予定である。本研究をさらに進めることで患者個々のTM-αの切断様式を同定できるため、TM-αの臨床効果の個体差要因を解明できると考えられる。また、相互作用しているタンパク質を同定することで、TM-αの抗炎症作用の機序を解明でき、DICに対する新規治療薬の開発に繋がることが期待できる。
The aim of this study was to elucidate the individual differences in the treatment of disseminated intravascular syndrome (DIC). This study begins with the investigation of the difference in severity of TM-alpha in vivo. TM-α is used for immunoprecipitation, and the market sells anti-inflammatory drugs. TM-α is used for immunoprecipitation. The immune system is designed to protect the immune system from virus infection. The antibody was prepared by immunoprecipitation of TM-α standard, SDS-PAGE, and 65 kDa TM-α standard. TM-α protein was detected by SDS-PAGE using anti-TM-α antibody. The interaction between TM-alpha decomposition products and their molecular weight is discussed. The molecular weight of TM-α is higher than that of TM-α, and the molecular weight of TM-α is higher than that of TM-α. In the future, the quality of the liquid will be determined by the mass analysis method. This study is aimed at clarifying the individual differences in clinical outcomes of TM-α in patients. The mechanism of anti-inflammatory action of TM-alpha is explained, and the development of new therapeutic agents is expected.

项目成果

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  • 财政年份:
    1974
  • 资助金额:
    $ 0.3万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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