「造血の場」としての間葉系幹細胞から検討する血液悪性疾患の発症メカニズム

从间充质干细胞作为“造血场”研究血液系统恶性疾病的发病机制

• 批准号: 16H00656
• 负责人: 杉野 典子
• 金额: $ 0.36万
• 依托单位: 京都大学医学部附属病院輸血細胞治療部
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16H00656/
• 关键词: 間葉系幹細胞; 骨髄異形成症候群

(研究目的)骨髄異形成症候群(以下MDS)は難治性の血液悪性疾患で、進行すると白血病に進展する。日本では高齢社会を背景に患者数が増加し、その対策は喫緊の課題である。造血の中心である骨髄には、血球の他に、造血を支持する間葉系幹細胞(以下MSC)が存在する。マウスではMSCの異常がMDSを引き起こすことが報告されており、MDSが骨髄環境の異常による疾患である可能性が示唆されている。本研究は、MDS患者の骨髄MSCの解析によってMDSの発症メカニズムを明らかにすることを目的とした。(研究方法)MDS患者からの骨髄液の入手については京都大学医学部附属病院倫理委員会の承認を得て行った。入手した6例のMDS患者の骨髄液を用いてMSCの分離・培養を試み、4例で分離・培養に成功した。4例の内訳は、低リスクMDS(RCMD)2例、高リスクMDS(RAEB-1, RAEB2)2例であった。MSCの分離・培養については、プラスチックディッシュに接着する細胞を継代する方法(接着法)を用いた。分離したMDS患者由来のMSC(以下MDS-MSC)と健常ドナーのMSC(以下HD-MSC)を用いて、1、CD34陽性造血幹前駆細胞(以下HSPC)との共培養実験及びフローサイトメトリー解析、2、MSCの分化誘導実験、3、マイクロアレイ法を用いた網羅的遺伝子発現解析を行った。(研究成果)1、HSPCとの共培養実験で、高リスクMDS由来のMDS-MSCと共培養した際にHSPCの増殖が有意に促進されることを確認した。2、MSCの分化誘導実験では、低リスクMDS由来のMDS-MSCでは脂肪への分化能が低下していたが、高リスクMDS由来のMDS-MSCでは上昇していた。3、遺伝子発現解析の結果、HD-MSCとMDS-HSCで有意な発現の傾向の差があり、また高リスクMDS由来と低リスクMDS由来のMDS-MSCでも差があることを見出した。現在、発現に差のある個々の遺伝子についてさらに解析を進めている。今後はさらに検体数を増やしてこれらの傾向の再現性を検討するとともに、遺伝子発現解析で変化を同定した遺伝子についてsiRNAを用いてMDS-MSCの性質が変化するかを検討する。

Objective: bone marrow forming syndrome (MDS) can be used to treat idiopathic hematological disorders and progression of leukemia. The number of patients from high-level social background in Japan has increased, and the number of patients in Japan has been greatly increased. The presence of hematopoietic cells in the center of hematopoiesis, bone marrow, other blood cells, hematopoietic support cells (the following MSC). The possibility of instigation of disease is indicated by the introduction of MSC reports, health reports, health care providers, and MDS health workers in the environment. In this study, the bone MSC of patients with MDS was analyzed in order to understand the symptoms of MDS disease. (research methods) the patients with MDS were treated with bone fluid, and the committee of the affiliated Hospital of Kyoto University Medical Department confirmed that it was feasible. 6 cases of MDS patients were treated with bone fluid and 4 cases were successfully isolated with MSC. There were 4 cases of endometriosis, 2 cases of low-risk MDS (RCMD) and 2 cases of high-risk MDS (RAEB-1, RAEB2). MSC is divided into two parts, one is the other, the other is the cell, the other is the following method. The causes of isolating patients with MDS: MSC (following MDS-MSC), healthy MSC (below HD-MSC), co-culture of progenitor cells (below HSPC) of sexual hematopoietic stem cells (HSPC), co-culture of progenitor cells (below HSPC), analysis of differentiation markers (2), differentiation markers of MSC (3), and analysis of cell lines in the Internet. (research results) 1. The origin of HSPC co-culture and high-level MDS is the origin of HSPC co-culture. (research results) 1. The origin of HSPC co-culture and high-level MDS is the origin of HSPC co-culture. (research results) 1. (research results) 1. HSPC co-culture and high-level HSPC co-culture are intended to promote the growth of HSPCs. 2. The differentiation of MSC leads to the development of MDS, the origin of MDS-MSC, fat, the ability of differentiation, the origin of MDS-MSC, the origin of high MDS, the origin of fat, the origin of low, high, low, high, low, low, 3. The results of the analysis of the results show that the HD-MSC MDS-HSC intended to show that there is a difference between the two, and that the higher the MDS, the lower the MDS, the better the performance. At present, it is possible to make a progress in the analysis and analysis of the two major financial institutions. In the future, you will need to know how many people you have in the future. In the future, you will need to know how to change the number of people you want to know. In the future, you will find out that the number of people you want to use in the future is different from that in the future. In the future, the number of people in the body will not change. In the future, the number of bodies will be changed. In the future, the number of bodies will be changed in the direction of MDS-MSC.