血小板凝集能測定装置を用いたHDLの機能評価法の構築

利用血小板聚集测定装置评价HDL功能的方法的构建

• 批准号: 17H00666
• 负责人: 宮崎 あかり
• 金额: $ 0.29万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17H00666/
• 关键词: 血小板; リポタンパク

酸化Low-density lipoprotein(酸化LDL)は、心筋梗塞などを誘発する粥状動脈硬化症の原因となるほか、血栓形成にも関与していると考えられている。実際、酸化LDLの受容体であるCD36が血小板に存在し、酸化LDLによって血小板由来のケモカインが放出されることなどが報告されている。一方、High-densitylipoprotein(HDL)は酸化LDLとは反対に抗動脈硬化作用があり、その一つとして抗血栓作用が知られているが、その評価法は確立されていない。そこで、本研究では血小板凝集能測定装置を用いたHDLの抗血栓作用評価法の開発を目的とした。血漿中リポ蛋白の影響を除外するため、ゲル濾過法あるいは遠心法による血小板精製法を構築した。LDLおよびHDLは超遠心法で分離した。LDLの一部は次亜塩素酸を用いて様々な条件下で酸化し、酸化法と酸化度の解析により、酸化LDL調整法を確立した。次に、精製血小板の凝集能をLDLあるいは酸化LDL添加と無添加で測定した。さらには、それらの血小板凝集実験に及ぼすHDLの影響を解析した。その結果、LDLおよび酸化LDLともに無添加の場合と血小板凝集能に有意な差はなかった。また、HDLの添加もそれらの凝集結果に影響を及ぼさなかった。酸化LDLに関する結果は予想に反したが、LDLの過度な酸化は血小板凝集を阻害するという報告もある。血小板精製がすでに血小板の活性化を誘導していること、生体内における酸化LDLによる血小板凝集促進、HDLによるその抑制が血小板凝集という最終結果のごく初期段階の作用である可能性などが原因と考えられる。したがって、血小板試料の調製法、微小血小板凝集塊を検出可能な測定装置等による解析、さらには血小板表面マーカーや放出されるβ-トロンボグロブリンの解析など、異なる方法による評価法についても検討を実施中である。

Acidified Low-density lipoprotein(acidified LDL) is the cause of atherosclerosis, the cause of myocardial infarction, and the cause of thrombosis. In fact, CD36 is present in the receptor of acidified LDL, and the origin of platelets is reported. One prescription, High-density lipoprotein (HDL) anti-acidification LDL anti-anti-atherosclerosis effect, the other anti-thrombosis effect, the other evaluation method is established. The purpose of this study is to develop a method for evaluating the antithrombotic effect of HDL using a platelet aggregation energy measurement device. In addition to the influence of plasma protein, the filtration method is used to construct the platelet purification method. LDL and HDL are separated from each other remotely. Part of LDL was acidified under the condition of acid, and the acidified LDL adjustment method was established. Next, refined platelet aggregation can be determined by adding LDL and not adding LDL. Analysis of the effect of platelet aggregation and HDL on platelet aggregation The result is that LDL is too acidic to be added. Platelet aggregation is intentionally poor. In addition, the addition of HDL has an impact on agglutination results. The results of LDL acidification are reported. Platelet purification can induce platelet activation, promote platelet aggregation in vivo, inhibit platelet aggregation in vivo, and ultimately affect the initial stage of platelet aggregation. Analysis, preparation method of platelet sample, detection possibility of microplatelet aggregation, measurement device, etc., analysis, release of platelet surface, β-ray emission, analysis of platelet aggregation, different methods, evaluation method, and implementation.