LC/ESI-MS/MSによる血中シロリムスの迅速TDM解析法の構築

LC/ESI-MS/MS血液西罗莫司快速TDM分析方法的构建

• 批准号: 23928009
• 负责人: 佐藤 真由美
• 金额: $ 0.38万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-23928009/
• 关键词: シロリムス; TDM; マトリックス効果

シロリムスは国内未承認の免疫抑制薬であるが、海外で臓器移植を受けたり、他の薬剤では免疫反応のコントロールが十分でない場合に、個人輸入により使用されることのある薬剤である。本剤は治療域が狭く、重篤な口内炎などの副作用が見られるうえ、体内動態の個人差も大きいことから、TDMによる投与量の厳密な調節が必要である。そこで本剤について、精度、真度に優れる標準法を確立し、臨床で利用可能な迅速分析法へと改良し、最終的に外来患者のTDMに利用可能な分析法を構築することを目的として研究を実施した。1.シロリムスやIS(アスコマイシン)のイオン化を抑制する分析試料中のリゾリン脂質の除去についてヒト全血に硫酸亜鉛/メタノール混液を加えて除タンパク処理した試料、除タンパク処理後ODS系のBond Elut C18(Varian)で固相抽出し、無機物や親水性爽雑物を除去した試料、さらにHybrid SPE-PPT(Sigma-Aldrich)にて固相抽出した試料に、既知量のシロリムスおよびISを添加し、LC/ESI-MS/MS分析した。その結果、除タンパク処理のみの試料では、シロリムスおよびISともにピーク面積が標準試料の2.5分の1以下となり、Bond Elut C18処理した試料ではISは標準試料と同程度まで回復したが、シロリムスは標準試料の6割程度となり、Hybrid SPE-PPT処理を加えることでようやく標準試料と同程度のピーク強度が得られることが判明した。すなわち、ヒト全血を硫酸亜鉛含有のメタノール溶液で除タンパクした後、Bond Elut C18で無機塩や水溶性爽雑物を除去し、さらにHybrid SPE-PPTカートリッジによりリン脂質を除去する一連の前処理法を用いることで、マトリックス効果の原因となるイオン化抑制因子を完全に除去できることが明らかとなった。2.確立した血中シロリムス定量法の分析法バリデーションについて本法は想定される血中濃度範囲を含む05～50ng/mLで良好な直線性を示し、満足し得る精度と真度を有することが判った。また、10名の健常成人から採取した血液を用いてマトリックスの影響を精査した結果、本法により内因性爽雑物の影響をほとんど受けない信頼度の高い定量が可能であることが明らかとなった。

シ ロ リ ム ス は domestic not admit の immunosuppression 薬 で あ る が, overseas で viscera transplant を け た り, he の 薬 tonic で は immune against 応 の コ ン ト ロ ー ル が very で な に い occasions, personal input に よ り use さ れ る こ と の あ る 薬 tonic で あ る. This tonic は treatment area が narrow く, Benedict inflammation な mouths な ど の side-effects が see ら れ る う え, poor body dynamic の personal も big き い こ と か ら, TDM に よ る cast and quantity の 厳 dense な adjusting が necessary で あ る. そ こ で this tonic に つ い て, the precision and the degree of に optimal れ る standard し, clinical で を established using analysis quickly な へ と improved の TDM に し, final に foreign patients may use な analysis を build す る こ と を purpose と し て research を be applied し た. 1. シ ロ リ ム ス や IS (ア ス コ マ イ シ ン) の イ オ ン change を inhibit す る analysis sample の リ ゾ リ ン lipid の remove に つ い て ヒ ト whole blood に 亜 lead sulfate / メ タ ノ ー を ル mixed liquid plus え て in addition to タ ン パ ク 処 Richard し た sample, in addition to タ ン パ ク 処 reason after ODS IS の Bond Elut C18 solid phase extraction (Varian) で し, inorganic や hydrophilic great 雑 を remove し た sample, さ ら に Hybrid SPE - PPT (Sigma Aldrich) に て solid-phase extraction し た sample に, both known quantity の シ ロ リ ム ス お よ び IS を add し, LC/ESI/MS/MS analysis し た. そ の results, in addition to タ ン パ ク 処 Richard の み の sample で は, シ ロ リ ム ス お よ び IS と も に ピ ー ク area が standard sample below 2.5 の の 1 と な り, Bond Elut C18 処 Richard し た sample で は IS は standard sample with degree ま と で reply し た が, シ ロ リ ム ス は standard sample の cut 6 level と な り, Hybrid SPE - PPT 処 を plus え る こ と で よ う や く standard sample と with degree の ピ ー ク が intensity ら れ る こ と が.at し た. す な わ ち, ヒ ト whole blood を 亜 lead sulfate containing の メ タ ノ ー で ル solution except タ ン パ ク し た, Bond after Elut C18 で inorganic salt や water-soluble shuang 雑 を remove し, さ ら に Hybrid SPE - PPT カ ー ト リ ッ ジ に よ り リ ン lipid を remove す る の in a row before 処 logos を with い る こ と で, マ ト リ ッ ク ス unseen fruit の reason と な る イ オ ン the inhibiting factor を に completely remove で き る こ と が Ming ら か と な っ た. 2. Establish し た blood シ ロ リ ム ス quantitative analysis の バ リ デ ー シ ョ ン に つ い て in は scenarios さ れ る blood levels van 囲 を containing む 05 ~ 50 ng/mL で な good linearity を し, against foot し る precision を と true degrees have す る こ と が convicted っ た. の ま た, 10 healthy adults often か ら take し た blood を with い て マ ト リ ッ ク ス の affect を check し た results, this law に よ り endogenous shuang 雑 content の influence を ほ と ん ど by け な quantitative が 頼 degree high の い い letter may で あ る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

妊娠と医薬品使用に関する問い合わせ内容の調査

关于怀孕和吸毒的询问的调查

• 发表时间: 2011
• 作者: Matsuda A;Kuno A;Kawamoto T;Matsuzaki H;Irimura T;Ikehara Y;Zen Y;Nakanuma Y;Yamamoto M;Ohkohchi N;Shoda J;Hirabayashi J;Narimatsu H;Hitoshi Sawada;小原拓
• 通讯作者: 小原拓

東日本大震災後の医薬品の確保-診療体制の維持と被災地支援-

东日本大地震后的药品保障 - 维持医疗体系、支援受灾地区 -

• 发表时间: 2011
• 作者: Mishima Y;Miyagi S;Saraya A;Negishi M;Endoh M;Endo TA;Toyoda T;Shinga J;Katsumoto T;Chiba T;Yamaguchi N;Kitabayashi I;Koseki H;Iwama A;久道周彦
• 通讯作者: 久道周彦

東日本大震災における東北大学病院薬剤部の対応(その1)-震災の概要と薬剤部業務体制および各方面への支援状況-

东北大学医院药学部对东日本大地震的应对（第1部分） - 地震概要、药学部的业务结构以及各领域的支援状况 -

• 发表时间: 2011
• 作者: Makide K;Kitamura H;Sato Y;Okutani M;Aoki J;金澤秀子;佐藤真由美
• 通讯作者: 佐藤真由美

東日本大震災における東北大学病院薬剤部の対応(その2)-通信網の破綻と外来診療体制の再構築-

东北大学医院药学部的东日本大地震应对（其二）～通信网络的崩溃和门诊治疗系统的重建～

• 发表时间: 2011
• 作者: Nakayama;et al.;我妻恭行
• 通讯作者: 我妻恭行

LC/ESI-MS/MSによるシクロホスファミドの高感度分析法の構築

使用 LC/ESI-MS/MS 构建环磷酰胺的高灵敏度分析方法

• 发表时间: 2011
• 作者: Ohmichi Y;Hirakawa J;Imai Y;Fukuda M;and Kawashima H.;森大
• 通讯作者: 森大