薬物スクリーニングキットのための限外ろ過フィルタを用いた溶血液前処理法

药物筛选试剂盒超滤溶血预处理方法

• 批准号: 24930001
• 负责人: 内田 雪絵
• 金额: $ 0.26万
• 依托单位: 広島県警察本部刑事部科学捜査研究所
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Scientists
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-24930001/
• 关键词: 簡易薬物スクリーニングキット; 法医中毒学; 除タンパクフィルタ

○研究目的:血液を簡易薬物スクリーニングキット(アキュサイン等)に適用させる方法として限外ろ過フィルタ(アミコンウルトラ,ミリポア社製)を用いる方法を以前の研究で開発した。この方法の実用化に向け,本フィルタを用いたときの薬物の回収率などを検討する。○研究方法:ベンゾジアゼピン系睡眠薬の一つであるトリアゾラムを対象薬物としてウマ溶血液に添加し,本フィルタで処理後有機溶媒で抽出し,ガスクロマトグラフ質量分析装置(GC/MS)で測定,定量する。また,フィルタろ過後のろ液の量を測定する。フィルタろ過後のろ液をアキュサインに滴下し,検出下限を求める。○研究成果:トリアゾラムを添加した水溶液をアミコンウルトラでろ過し,抽出後GC/MSで分析したところ,フィルタへの吸着が認められた。そのため,膜の材質が異なるフィルタを用意し,吸着率が変化するか検討を行った。6種類のフィルタを用いて比較した結果,ビバスピン2(分画分子量30,000,膜材質Hydrosart〓,ザ〓トリウス社製)が最も回収率が良好であった。トリアゾラムを添加したウマ溶血液をビバスピン2でフィルタろ過し,分析したところ,トリアゾラム量は水溶液の場合の1割程度であった。これはトリアゾラムの血漿蛋白結合率が9割程度であることに起因している。一方,ウマ溶血液をビバスピン2でろ過したときのフィルタ透過率は30～40%であった。このことから,ろ液中のトリアゾラム量は1割程度に低下するものの,ろ液中の濃度としてはその2,5～3倍程度に上がることが期待できる。血液約0.5mlをビバスピン2で10分間遠心すればアキュサインBZO(関東化学社製)に滴下するのに十分なろ液量が得られ,血中トリアゾラム濃度が1ppm程度でも陽性を示した。

○ Objective of the study: To develop the method of applying simple blood substance to the study. The application of this method is discussed in detail.○ Research methods: For sleep related substances, the organic solvent was extracted after the treatment of dissolved blood, measured by GC/MS, and quantified. The amount of liquid after the test is determined. After the test, the liquid will drop down and the lower limit will be found.○ Research results: After extraction, GC/MS analysis was carried out. The film material is different, and the adsorption rate is different. The results of comparison of 6 kinds of hydroart-containing materials showed that the best recovery rate was obtained in the case of 2 kinds of hydroart-containing materials (molecular weight 30,000, membrane material Hydrosart, membrane system). For example, if you want to add more water to the solution, you can use it for analysis. The plasma protein binding rate of the two groups is 9 degrees. On the other hand, the transmittance of dissolved blood is 30~40%. In this case, the concentration of vitamin C in the solution is 1-fold lower, and the concentration in the solution is 2, 5 - 3 times higher. About 0.5 ml of blood was dropped into the solution at 2 minutes and 10 minutes. The concentration of blood in the solution was about 1ppm.