薬物スクリーニングキットのための限外ろ過フィルタを用いた溶血液前処理法

○研究目的:血液を簡易薬物スクリーニングキット(アキュサイン等)に適用させる方法として限外ろ過フィルタ(アミコンウルトラ,ミリポア社製)を用いる方法を以前の研究で開発した。この方法の実用化に向け,本フィルタを用いたときの薬物の回収率などを検討する。○研究方法:ベンゾジアゼピン系睡眠薬の一つであるトリアゾラムを対象薬物としてウマ溶血液に添加し,本フィルタで処理後有機溶媒で抽出し,ガスクロマトグラフ質量分析装置(GC/MS)で測定,定量する。また,フィルタろ過後のろ液の量を測定する。フィルタろ過後のろ液をアキュサインに滴下し,検出下限を求める。○研究成果:トリアゾラムを添加した水溶液をアミコンウルトラでろ過し,抽出後GC/MSで分析したところ,フィルタへの吸着が認められた。そのため,膜の材質が異なるフィルタを用意し,吸着率が変化するか検討を行った。6種類のフィルタを用いて比較した結果,ビバスピン2(分画分子量30,000,膜材質Hydrosart〓,ザ〓トリウス社製)が最も回収率が良好であった。トリアゾラムを添加したウマ溶血液をビバスピン2でフィルタろ過し,分析したところ,トリアゾラム量は水溶液の場合の1割程度であった。これはトリアゾラムの血漿蛋白結合率が9割程度であることに起因している。一方,ウマ溶血液をビバスピン2でろ過したときのフィルタ透過率は30～40%であった。このことから,ろ液中のトリアゾラム量は1割程度に低下するものの,ろ液中の濃度としてはその2,5～3倍程度に上がることが期待できる。血液約0.5mlをビバスピン2で10分間遠心すればアキュサインBZO(関東化学社製)に滴下するのに十分なろ液量が得られ,血中トリアゾラム濃度が1ppm程度でも陽性を示した。

○研究目的:血液を簡易薬物スクリーニングキット(アキュサイン等)に適用させる方法として限外ろ過フィルタ(アミコンウルトラ,ミリポア社製)を用いる方法を以前の研究で開発した。この方法の実用化に向け,本フィルタを用いたときの薬物の回収率などを検討する。○研究方法:ベンゾジアゼピン系睡眠薬の一つであるトリアゾラムを対象薬物としてウマ溶血液に添加し,本フィルタで処理後有機溶媒で抽出し,ガスクロマトグラフ質量分析装置(GC/MS)で測定,定量する。また,フィルタろ過後のろ液の量を測定する。フィルタろ過後のろ液をアキュサインに滴下し,検出下限を求める。○研究成果:トリアゾラムを添加した水溶液をアミコンウルトラでろ過し,抽出後GC/MSで分析したところ,フィルタへの吸着が認められた。そのため,膜の材質が異なるフィルタを用意し,吸着率が変化するか検討を行った。6種類のフィルタを用いて比較した結果,ビバスピン2(分画分子量30,000,膜材質Hydrosart〓,ザ〓トリウス社製)が最も回収率が良好であった。トリアゾラムを添加したウマ溶血液をビバスピン2でフィルタろ過し,分析したところ,トリアゾラム量は水溶液の場合の1割程度であった。これはトリアゾラムの血漿蛋白結合率が9割程度であることに起因している。一方,ウマ溶血液をビバスピン2でろ過したときのフィルタ透過率は30～40%であった。このことから,ろ液中のトリアゾラム量は1割程度に低下するものの,ろ液中の濃度としてはその2,5～3倍程度に上がることが期待できる。血液約0.5mlをビバスピン2で10分間遠心すればアキュサインBZO(関東化学社製)に滴下するのに十分なろ液量が得られ,血中トリアゾラム濃度が1ppm程度でも陽性を示した。