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肺サーファクタント蛋白質D受容体を介するマクロファージ調節機構の解析

肺表面活性蛋白D受体介导的巨噬细胞调控机制分析

基本信息

批准号：
08770107
负责人：
小笠原由法
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、肺胞II型細胞で合成、分泌される肺サーファクタント(脂質-蛋白質複合体)に含まれるC型レクチンSP-Dに着目し、肺胞細胞における機能発現、特にマクロファージを介するSP-Dの生理機能の解明を目的とした。以下に述べる新たな知見を得る成果を上げたが、受容体解析については今後の課題となった。1.遺伝子組み換えヒトSP-DをCHO細胞を用いて発現した。発現された遺伝子組み換え蛋白質は分子量、抗ヒトSP-Dモノクローナル抗体との反応性においてNative SP-D)と全く相同であった。ヒト肺胞洗浄液からSP-Dを精製することが非常に困難なことから、大量に調製可能な組み換えSP-D発現によって、その構造・機能解析が容易となった。2.変異導入遺伝子組み換えSP-Dを1と同様にCHO細胞を用いて発現、精製した。変異蛋白質としてはSP-Dの1)コラーゲン領域欠損体、2)ネック領域欠損体、3)N端分子間ジスルフィド結合欠損体、4)CRD領域におけるヒトSP-Aとのキメラ体を調製し、それぞれの構造と検討した。とくに4)において、ヒトSP-Dの糖質結合特異性責任領域からN端へのアミノ酸10残基(Glu310-Pro319)がSP-Dの脂質結合能に関与していることが示唆された。3.^<35>S標識遺伝子の組み換えSP-Dと肺胞細胞ホモジネートとのリガンド結合実験によい、分子量約14万のSP-D結合蛋白質の存在が明らかとなった。現在この蛋白質の解析に取り組んでいる。

In this study, the synthesis and secretion of type II lung cells, the synthesis and secretion of lung cells, the synthesis The following is a description of the new information on the results, and the analysis of the acceptors. 1. This sub-organization will enable SP-D CHO cells to see how much information you need to receive. The results showed that the molecular weight of subgroup protein, anti-SP-D protein, anti-SP-D protein, anti-protein protein and anti-DNA protein were all the same. The lung cell washing fluid is very difficult to detect by SP-D, and a large number of lung washers may cause SP-D to detect lung cancer, and the machine can analyze it easily. two。 Import the sub-group "SP-D" 1 with the same "CHO" cell to display and analyze the data. The target protein is known as SP-D, 2) the domain, 3) the N-terminal intermolecular mass transfer, 4) the CRD domain, the SP-A, the terminal, the body, the terminal, the body. 4) the combination of N-terminal amino acid 10 residues (Glu310-Pro319) and SP-D lipids in any specific domain can be demonstrated by the combination of homozygous and SP-D lipids. 3. The lt;35>S tag subgroup, SP-D, lung cell, cell cycle, cell cycle, molecular weight, molecular weight, SP-D binding protein, molecular weight, SP-D binding protein, molecular weight, molecular weight and molecular weight were determined. Now we are going to analyze the protein and analyze the data of the tissue samples.