TGF-βスーパーファミリーの受容体型セリン・キナーゼの機能解析

TGF-β超家族受体丝氨酸激酶的功能分析

• 批准号: 08770235
• 负责人: 土田 邦博
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770235/
• 关键词: TGFβ; BMP; キメラ蛋白; 受容体型セリン・キナーゼ; 多能性幹細胞

1)TGFβ型受容体セリン・キナーゼの細胞外領域とヒトIgG定常領域のキメラ蛋白を作製・精製し、機能阻害活性を検討した。ALK3(BMP type I受容体)-IgGは、MC3T3-El(骨芽細胞)、PA6(脂肪前駆細胞)のストローマ細胞において、20ng/mlのBMP4によるアルカリ・フォスファターゼ活性誘導を濃度依存性に抑制し、1μg/mlで完全に阻害した。また、東レの須藤博士より供与された、TGFβRII-IgGは、血管内皮細胞において、5ng/mlのTGFβによる細胞外基質蛋白の転写活性誘導を50ng/mlで完全に抑制した。これらのキメラ蛋白は可溶性であり、他のリガンドの作用は阻害せず、生理的なリガンドに特異的に働く。また、モノクローナル抗体作製の際の免疫原としても有効である。2)多能性幹細胞から細胞外基質蛋白でコートしたシャーレの使用やストローマ細胞株OP9との共培養により、Flk-1陽性の血液細胞、血管内皮前駆細胞を分化誘導する実験系を開発している。BMP4,TGF-βが、この系において、分化誘導の抑制、分化維持の阻害作用があることを見いだした。3)受容体型セリン・キナーゼの保存されたキナーゼ領域に対するプライマーを合成し、PCR反応を行い、新規の膜貫通型セリン・キナーゼを同定した.TGFβタイプI受容体、アクチビンタイプIB受容体と、細胞内キナーゼ領域で80%以上の相同性を有する新鋭のタイプI受容体セリン・キナーゼ(ALK7)を同定した。ALK7のmRNAは、ラットにおいて脳組織、特に、前脳、基底核、小脳で高い発現が見られた。生理的なリガンドは、不明であるが、その構造上、TGFβファミリーのタイプI受容体として、機能すると考えられる。

1) The Keira protein in the extracellular domain of the TGFβ-type receptor Serinin Kenakai and the constant domain of β-IgG was prepared, refined, and its functional blocking activity was investigated. ALK3 (BMP type I receptor)-IgG, MC3T3-El(bone bud cell), PA6 (adipocyte) and BMP4 (20ng/ml) inhibited concentration-dependent induction of ALK3-IgG activity, and 1μg/ml completely inhibited it. TGFβRII-IgG completely inhibited the induction of extracellular matrix protein activity in vascular endothelial cells by 50ng/ml of TGFβ. These proteins are soluble, they act as inhibitors, they act as physiological inhibitors, and they are specific. The immunogen used in the production of anti-HIV antibodies 2)The development of pluripotent stem cells, including extracellular matrix protein, Flk-1 positive blood cells and vascular endothelial cells in co-culture with OP9 cell line BMP4,TGF-β, differentiation inhibition, differentiation maintenance inhibition. 3)The receptor type is the same as the receptor type, the receptor type is the same as the receptor type, and the receptor type is the same as the receptor type. The receptor type is the same as the receptor type. The receptor type is the same as the receptor type. ALK7 mRNA is found in tissues, tissues, anterior nuclei, basal ganglia, and small ganglia. Physiological characteristics, structural characteristics, TGFβ, receptor characteristics, functional characteristics

项目成果

K.Tsuchida他7名: "Activin Signal Transduction and the Role of TGF-β Superfamily in Cell Differentiation" Ares-SSerono Symposia Publications. (発表予定).

K. Tsuchida 和其他 7 人：“激活素信号转导和 TGF-β 超家族在细胞分化中的作用”Ares-SSerono 研讨会出版物（待提交）。

K.Tsuchida他3名: "Molecular Cloning of a Novel Type I Receptor Serin/Threonine Kinase for the TGFβ Superfamily from Rat Brain" Molecular and Cellular Neuroscience. 7. 467-478 (1996)

K. Tsuchida 和其他 3 人：“来自大鼠脑的 TGFβ 超家族的新型 I 型受体丝氨酸/苏氨酸激酶的分子克隆”《分子和细胞神经科学》7. 467-478 (1996)。

W.Vale他10名: "Activins and the Receptor Serine Kinase Superfamily" Ares-Serono Symposia Publications. (発表予定).

W. Vale 和其他 10 人：“激活素和受体丝氨酸激酶超家族”Ares-Serono Symposia Publications（待出版）。