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培養血管内皮細胞と培養表皮細胞移植を併用した人工真皮の新規な適用法の検討-人工皮膚開発にむけての培養表皮生着率の向上-

利用培养血管内皮细胞和培养表皮细胞移植的人造真皮新应用方法的研究-提高培养表皮移植率用于人造皮肤的开发-

基本信息

批准号：
08770689
负责人：
副島一孝
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770689/
关键词：
人工皮膚人工真皮培養血管内皮細胞培養表皮

项目摘要

今日、人工真皮が臨床の場で普及しつつあるが、培養表皮の生着率は不良で2期的に分層植皮をせざるを得ず、恵皮部に制限のある疾患の治療に際して培養表皮生着率の向上が望まれている。そこで今回人工真皮移植に培養血管内皮細胞移植を併用してその培養表皮生着率に影響するか否かを検討した。血管内皮細胞はウィスター系ラットの胸部大動脈より調整し感温性ディッシュ上でexplant cultureすることで培養した。表皮細胞も同種同系ラット皮膚より調整し3T3 feeder layer法にて培養した。次に同種同系ラット背部に全層皮膚欠損創(3×3cm)を作成し、人工真皮(Pelnac^<TM>,GUNZE,Co.,Japan)を移植した。その際に血管内皮細胞を移植床と人工真皮の間に移植した群とそうでない対照群を作成した。3週間経過して真皮様組織が構築された後その上に培養表皮を移植し、その生着の有無を検討した。ラット大動脈より調整培養された細胞は電子顕微鏡でWeibel-Palade bodyが確認されたことで血管内皮細胞と同定された。人工真皮によって構築された真皮様組織は血管内皮細胞移植群で有意に真皮内上行血管の増加がみられ、また血管網も構築されていた。また対照群と比較して収縮も有意に少なかった。しかし、培養表皮の生着は得られなかった。人工真皮に培養血管内皮細胞を併用することで真皮内血管が増加しより生体に近い真皮様組織が構築されたと考察されたが、培養表皮の生着率の向上は得られなかった。一般に植皮が生着する過程は血管の再構築によるが、培養表皮のそれは基底膜の再構築によるので血管内皮細胞以外に必要な因子の存在が考察された。また今回用いた血管内皮細胞は大動脈由来のものであったが真皮由来の血管内皮細胞での検討も必要であると考えられた。生体の真皮を構成する因子は未だ未知なものがあそのうちの何が基底膜再構築に必須なのかの検討は今後の課題である。現在、真皮由来線維芽細胞と真皮由来培養血管内皮細胞の混合培養系と人工真皮の併用を検討中である。

Today, artificial dermis is widely used in clinical practice, and the growth rate of cultured epidermis is expected to increase in the treatment of diseases due to poor skin grafting and skin control in the second stage. The effect of transplantation of cultured vascular endothelial cells on the survival rate of cultured epidermis in artificial dermis transplantation was discussed. Vascular endothelial cells are cultured in vitro in response to temperature changes in the thoracic arteries. Epidermal cells were cultured by T3 feeder layer method. The second is the full thickness skin damage (3×3cm) of the same homologous line on the back. Artificial dermis (Pelnac^<TM>,GUNZE,Co., Japan). The vascular endothelial cells were transplanted into the artificial dermis. After 3 weeks, the dermis tissue was constructed, and the cultured epidermis was transplanted, and the existence of the epidermis was discussed. The vascular endothelial cells were identified by electron microscopy. The artificial dermis was constructed by vascular endothelial cell transplantation, and the ascending blood vessels in the dermis were intentionally increased. The comparison between the two groups is intentional. The growth of cultured epidermis is not easy. Artificial dermis cultured vascular endothelial cells were used to investigate the growth rate of cultured epidermis in vivo. In general, the process of skin grafting includes vascular reconstruction, culture of epidermis, basement membrane reconstruction, and the existence of essential factors other than vascular endothelial cells. The blood vessel endothelial cells of origin of the aorta and dermis are necessary for investigation. The factors of dermis composition in vivo are unknown, and the necessary problems for basement membrane reconstruction are discussed. Now, the mixed culture system of dermal derived vascular bud cells and dermal derived cultured vascular endothelial cells and artificial dermis are discussed.