TNF刺激による血管内皮細胞の過酸化水素産生に及ぼす麻酔薬の影響

ウシ頸動脈より得た継代培養血管内皮細胞(国立衛生試験所細胞バンク)を,20%ウシ胎児血清加イ-グルMEM培地で,5%CO2,15%air,37℃の環境下で培養した.培養血管内皮細胞の上清を,臨床使用濃度とその100倍の高濃度のpropofol,thiopentone,midazolam,ketamineを含むHBSSlmlで完全に置換し,1時間pre-incubationした.麻酔薬負荷後の培養血管内皮細胞の上清を,5μMDCFH-DA(膜透過性過酸化水素感受性蛍光色素)を含むHBSSlmlで完全に置換し、5分間pre-incubationした.共焦点レーザー顕微鏡を用い,培養血管内皮細胞を488nmのレーザー光で励起,530nmで蛍光測定をしながら,THFα20ng/mlを含むHBSSlmlを負荷し,TNF投与前後の血管内皮細胞内過酸化水素濃度の変化を測定した.Ketamine投与下では,血管内皮細胞内酸化ストレスは抑制される傾向を認めた.本研究は,ketamineの脳保護作用のメカニズム解明に,貢献する可能性がある.

ウシ頸動脈より得た継代培養血管内皮細胞(国立衛生試験所細胞バンク)を,20%ウシ胎児血清加イ-グルMEM培地で,5%CO2,15%air,37℃の環境下で培養した.培養血管内皮細胞の上清を,臨床使用濃度とその100倍の高濃度のpropofol,thiopentone,midazolam,ketamineを含むHBSSlmlで完全に置換し,1時間pre-incubationした.麻酔薬負荷後の培養血管内皮細胞の上清を,5μMDCFH-DA(膜透過性過酸化水素感受性蛍光色素)を含むHBSSlmlで完全に置換し、5分間pre-incubationした.共焦点レーザー顕微鏡を用い,培養血管内皮細胞を488nmのレーザー光で励起,530nmで蛍光測定をしながら,THFα20ng/mlを含むHBSSlmlを負荷し,TNF投与前後の血管内皮細胞内過酸化水素濃度の変化を測定した.Ketamine投与下では,血管内皮細胞内酸化ストレスは抑制される傾向を認めた.本研究は,ketamineの脳保護作用のメカニズム解明に,貢献する可能性がある.