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腎癌内の微少発現遺伝子検出法の開発-In Situ RT-PCR法とCGH法の応用-

肾癌微量表达基因检测方法的开发-原位RT-PCR法和CGH法的应用-

基本信息

批准号：
08771290
负责人：
奥田比佐志
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771290/
关键词：
腎癌 RT-PCR 微少遺伝子

项目摘要

◆腎細胞癌手術摘出標本でのin situ PCR法(1)正常組織のin situ PCR法正常組織でのβ-actin、cadherin、c-myc、PyNPaseの発現の確認(ノーザン法、10例全例確認)(2)確認した組織でRT-PCR法を行う。(10検体 β-actin、cadherin、c-myc、PyNPaseを使用した。)→β-actin、cadherin、PyNPaseは全例に発現を認めた。c-mycは3例に確認され、残り7例には確認されず。(3)腎癌組織でβ-actin、cadherin、PyNPase等のmRNAの発現を確認した。(ノーザン法、15検体)→15検体全例に発現を認めた。(4)腎癌組織を用いてin situ RT-PCR法(15検体、β-actin、cadherin、c-myc、PyNPase)→β-actin、cadherinは全例に確認された。c-mycは5例に発現を認めた。PyNPaseは4例に発現を認めた。◆CGH(comparative genomic hybridyzation)法を用いて染色体上の遺伝子の位置関係の検索。(1)3番染色体における異常の検出:腫瘍組織の遺伝子DNAをCGH手法を用いて検索した。→3番染色体のコピー数に検体ごとに大きな差があった。(約70%の減弱)その責任遺伝子座を今後探索していく予定である。

◆Renal cell carcinoma surgical specimens in situ PCR method (1) Normal tissue in situ Confirmation of the presence of β-actin, cadherin, c-myc, and PyNPase in normal tissues by PCR (ノーザン method, confirmation of all 10 cases) (2) Confirmation of the use of RT-PCR method in normal tissues. (10検β-actin, cadherin, c-myc, and PyNPase are not used.) → β-actin, cadherin, and PyNPase are all listed below. c-myc has confirmed 3 cases and confirmed 7 cases of c-myc. (3) Confirmation of mRNA expression of β-actin, cadherin, PyNPase, etc. in renal cancer tissue. (ノーザン法, 15検体) → All examples of 15検体 are now recognized. (4) Renal cancer tissue was confirmed using the in situ RT-PCR method (15-body, β-actin, cadherin, c-myc, PyNPase)→β-actin and cadherin. Five cases of c-myc have been identified. Four cases of PyNPase have been identified. ◆The CGH (comparative genomic hybridyzation) method uses the method to determine the positional relationship between the remaining elements on the chromosome. (1) The abnormality of chromosome 3 is detected: the residual DNA of the tumor tissue is detected by CGH technique. →The number of chromosomes in the third phase is the same as the number of chromosomes. (Approximately 70% of the weakening) It is decided that the future exploration of the responsibility will be carried out.