エキシマレーザー角膜表層切除後の上皮下混濁とTGF-βの関係

准分子激光角膜浅层切削术后上皮下混浊与TGF-β的关系

基本信息

批准号：
08771467
负责人：
小幡博人
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771467/
关键词：
TGF-β 角膜エキシマレーザー創傷治癒

项目摘要

ネコの角膜に、エキシマレーザー(EC-5000,NIDEK社)照射により角膜実質表層切除を行ない、in vivoの創傷治癒過程における上皮下混濁の定量とTGF-βスーパーファミリーの各因子のリガンドとレセプターの発現を経時的に調べた。同時に種々の細胞外マトリックスの発現についても検討した。上皮下混濁の強さは、Scheimpflug原理に基づく散乱光強度測定装置(TSPC,NiDE社)でCCT値で表した。経時的に眼球摘出を行ない、TGF-βスーパーファミリーの各因子のリガンドとレセプターの発現を各々に対する抗体を用いて免疫組織化学的な検出を行った。角膜上皮下の混濁の強さは照射後3日、7日では軽度であり、4週で顕著となり、10週で術前値に近い値を示した。上皮下混濁部位に相当する線維性組織では、コラーゲンIII、IV型およびおよびラミニンの発現が増加していた。また、TGF-β1,2,3-LAP、およびTGF-β1,II型受容体の発現は、照射後3日後では軽度、7日ではやや強く、4週で最も強く認められたが、10週ではほとんど消失していた。TGF-βスーパーファミリーのアクチビン受容体やBMP受容体も同様の発現パターンを示した。細胞外マトリックス発現の変化とTGF-βおよびその受容体の発現の変化はほぼ同期しており、また、これらの発現が臨床的に問題となる上皮下混濁の強さとも同期していた。このことから上皮下混濁の制御とTGF-βの関与が強く示唆された。現在、中和抗体投与による上皮下混濁の変化について検討中である。また、in situ hybridization法によりmRNAの発現をみている。in vitroの系として、ウサギ、ラットの角膜実質細胞の培養を行なっており、in vivoの系でみられた変化が、培養系でも観察されるか否か確認中である。

对猫的角膜进行了进取激光（EC-5000，NIDEK）进行切除的角膜基质，并在体内的伤口愈合过程中测定上皮下不透明度，以及TGF-β超级家庭的每个因素的配体和受体的表达。同时，还研究了各种细胞外基质的表达。使用基于scheimpflug原理的散射光强度测量装置（TSPC，NIDE），上皮下不透明度的强度表示为CCT值。随着时间的流逝，去除眼球，并使用针对每个因素（免疫组织化学检测）的抗体进行了TGF-β超家族的每个因素的表达。辐照后3和7天，亚副不透明的强度是轻度的，在4周时发音，在10周时接近术前值。胶原蛋白III，IV型和层粘连蛋白的表达在与上皮下不透明度位点相对应的纤维组织中增加。此外，TGF-β1,2,3-lap和TGF-β1，II受体的表达在辐照后3天轻度，在7天时稍强，并且在4周时最强烈地观察到，但在10周时几乎消失了。 TGF-β超家族的激活素受体和BMP受体显示出相似的表达模式。细胞外基质表达的变化和TGF-β及其受体表达的变化几乎同步，并且还与上皮下不透明度的强度同步，这是临床上有问题的。这强烈表明了上皮下不透明的控制和TGF-β的参与。当前，正在研究由于中和抗体引起的下皮下不透明度的变化。另外，通过原位杂交监测mRNA表达。作为一种体外系统，培养了兔和大鼠的角膜实质细胞，目前正在证实是否还可以在体内系统中观察到在培养系统中看到的变化。