歯周病原菌による多型核白血球・貧食能の変動並びに関連レセプターmRNAの検索

寻找牙周病原菌引起的多形核白细胞及吞噬功能的变化及相关受体mRNA

• 批准号: 08771688
• 负责人: 田井 秀明
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771688/
• 关键词: Porphyromonas gingivalis; 多形核白血球; Fcレセプター; mRNA; RT-PCR

先に、健常者末梢血由来の多形核白血球(PMN)を採取し、歯周病原菌のひとつであるPorphyromonas gingivalis(P.gingivalis)由来可溶性成分、特にプロテアーゼで刺激すると、PMN貧食能は有意に抑制され、同時にIgG-FcRII&III発現の低下及び補体レセプターCRI発現の低下することを報告した(Infect Immun,1993)。また、本教室の杉田らは、歯周炎罹患者の歯肉溝滲出液(GCF)中PMN-CRI&3mRNAレベルの低下を報告(Archs oral Biol,in press)し、さらに宮崎らはGCF中PMNのIgG依存性貧食能の抑制、FcRII&III発現の低下及びFcRmRNAレベルの低下を報告した(J Periodont Res,in press)。以上の所見を踏まえ、まずP.gingivalis由来可溶性成分刺激によるPMN-FcRII&IIImRNAレベルの変動をin vitroで検討する目的で以下の実験を行った。健常者末梢血由来のPMNを採取、分離後、P.gingivalis可溶性成分で刺激する。PMNよりAGPC法にて全RNAを抽出後、あらかじめ設計された特異的プライマーを用いてRT-PCR法による増幅及びアガロースゲル電気泳動を行い各バンドの検出を行った。更にNIH Imageにてバンド濃度の画像解析を行い、β-Actinをコントロールとして各レセプターmRNAを半定量化した。その結果、刺激物質のタンパク濃度が高いとFcRII&IIImRNAレベルも増加するものの、濃度依存性は認められなかった。このことは、P.gingivalis可溶性成分中にはプロテアーゼなどの病原性因子が複数存在していることを示唆しており、更なる検討が不可欠である。

First, に, polymorphonuclear leukocytes (PMN) from the peripheral blood of healthy individuals を, 歯, peripheral pathogenic bacteria に ひと である であるPorphyromonas Gingivalis (P.g ingivalis) soluble composition, origin に プ ロ テ ア ー ゼ で stimulus す る と, PMN poor food can suppress さ は intentionally に れ, at the same time - FcRII&III に IgG 発 の is low and now び complement レ セ プ タ ー CRI 発 now low の す る こ と を report し た (Infect Immun,1993. Youdaoplaceholder0 report on the low level of PMN-CRI&3mRNA in the 歯 sulcus exudate (GCF) of patients with 歯 periodontitis and suchida ら を Report on <s:1> inhibition of <s:1> IgG-dependent oligoia in PMN, <s:1> low occurrence of FcRII&III and <s:1> low <s:1> of びFcRmRNAレベ ら た を (J Periodont Res,in press) た, さらに miyazaki ら ら GCF. Seen above の を tread ま え, ま ず P.g ingivalis origin soluble ingredients stimulate に よ る PMN - FcRII&IIImRNA レ ベ ル の - move を in vitro で す 検 please る purpose under で の be 験 を line っ た. In healthy individuals, PMN from peripheral blood is を taken, separated, and then stimulated with P.gingivalis soluble component で する. Method of PMN よ り AGPC に て total RNA を pulled out after, あ ら か じ め design さ れ た specific プ ラ イ マ ー を with い て rt-pcr method に よ る rights and picture び ア ガ ロ ー ス ゲ ル electric 気 swimming を い each バ ン ド の 検 を row っ た. More に NIH Image に て バ ン ド concentration の portraits line analytical を い, beta Actin を コ ン ト ロ ー ル と し て each レ セ プ タ ー mRNA を half quantitative し た. そ の results, stimulating substance の タ ン パ ク high concentration が い と FcRII&IIImRNA レ ベ ル も raised plus す る も の の, concentration dependence は め ら れ な か っ た. こ の こ と は, P.g ingivalis soluble components in に は プ ロ テ ア ー ゼ な ど の が plural pathogenic factor existence し て い る こ と を in stopping し て お り, more な る beg が 検 not owe で あ る.