細胞内抗原検出法による歯周炎病変局所の多形核白血球動態とIL-8産生の解明

使用细胞内抗原检测方法阐明牙周炎病变中多形核白细胞动力学和 IL-8 的产生

• 批准号: 08771663
• 负责人: 葛城 啓彰
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08771663/
• 关键词: 多形核白血球; 歯肉溝滲出液; IL-8; 細胞内抗原検出法; フローサイトメトリー; ELISA

1.歯周炎患者歯肉溝局所でのIL-8産生の検討細胞内抗原検出法を応用したフローサイトメトリー解析、およびABC法による免疫組織化学から歯肉溝滲出液中の多形核白血球のIL-8産生を検索した結果、成人性歯周炎患者(n=15)では、IL-8陽性多形核白血球は、71.9±10.6%を示し、嫌常人の歯肉溝滲出液中の多形核白血球のIL-8陽性率は、30.8±12.9%であり、患者群で有意に高い値を示した。同時に歯肉溝液中のIL-8量をELISA法で測定した結果、患者群では1250±750pg/30s,健常者群では200±300pg/30sを示し、患者群で有意に増加しており、多形核白血球の細胞内IL-8産生と一致する結果を示した。2.歯周病原菌貧食刺激による多形核白血球からのIL-8産生の検討P.gingivalis,A.actinomycetemcomitans,F.nucleatumの三種の歯周病原菌の貧食刺激に伴う多形核白血球からのIL-8産生は、食菌開始後1時間から多形核白血球の30〜50%に認められ6時間後にはP.gingivalis刺激:72.7±5.8%,A.actinomycetemcomitans刺激:65.5±8.6%,F.nucleatum刺激:80.5±14.5%を示した。各歯周病原菌貧食刺激時の多形核白血球培養上清中のIL-8量をELISA法で測定した結果、反応開始後2時間までは殆ど認められないが、反応開始後3時間にはP.gingivalis刺激:503±42pg/ml,A.actinomycetemcomitans刺激:448±20pg/ml,F.nucleatum刺激:348±72pg/mlを示し,反応開始後6時間にはP.gingivalis刺激:763±74pg/ml,A.actinomycetemcomitans刺激:741±178pg/ml,F.nucleatum刺激:789±174pg/mlを示した。以上の実験結果から多形核白血球からの貧食刺激に伴うIL-8産生を歯周病変局所およびIn vitroで明かにした。

1. Detection of IL-8 production in dental sulcus exudates by intracellular antigen assay and ABC method. Results of detection of IL-8 production in polymorphonuclear leukocytes in dental sulcus exudates by immunohistochemistry. IL-8 positive polymorphonuclear leukocytes in adult patients with periodontitis (n=15) were 71.9±10.6%. IL-8 positive rate of polymorphonuclear leukocytes in dental crevicular exudate was 30.8±12.9% in normal people and significantly higher in patient group. IL-8 levels in dental crevicular fluid measured by ELISA were 1250±750pg/30s in the patient group and 200±300pg/30 s in the healthy group. IL-8 production in polymorphonuclear leukocytes was consistent in the patient group, which was intentionally increased. 2. IL-8 production by PMCs from three kinds of peridental pathogens induced by hypophagy: P. gingivalis,A.actinomycetemcomitans,F.nucleatum. IL-8 production by PMCs from three kinds of peridental pathogens induced by hypophagy: P.gingivalis:72.7± 5.8%, A. actinomycetemcomitans:65.5± 8.6%, F. nucleatum:80.5±14.5%; IL-8 levels in culture supernatant of polymorphonuclear leukocytes were measured by ELISA at the time of starvation of each peridental pathogen. The results showed that at 2 hours after the start of the reaction, at 3 hours after the start of the reaction, P.gingivalis stimulation:503±42pg/ml,A.actinomycetemcomitans stimulation:448±20pg/ml,F.nucleatum stimulation:348±72pg/ml, and at 6 hours after the start of the reaction, P.gingivalis stimulation:763±74pg/ml,A.actinomycetemcomitans stimulation:741±178pg/ml,F.nucleatum stimulation:789±174pg/ml. The results of the above study were as follows: Polymorphocyte depletion, IL-8 production, peripheral disease, and In vitro stimulation.

项目成果

Hiroaki Katsuragi: "IL-8 production from neutrophils after phagocytosis of Periodontal Pathogens" Journal of Dental Research. 76. 345- (1997)

Hiroaki Katsuragi：“吞噬牙周病原体后中性粒细胞产生 IL-8”《牙科研究杂志》。