脊索動物ホヤにおける筋肉アクチン遺伝子の発現調節機構

脊索动物海鞘中肌肉肌动蛋白基因表达的调节

• 批准号: 08780694
• 负责人: 日下部 岳広
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780694/
• 关键词: 脊索動物; ホヤ; 筋肉アクチン遺伝子; 細胞分化; 転写調節

1.ホヤ筋肉アクチン遺伝子の上流領域の塩基配列の比較:3種のホヤの11個の筋肉アクチン遺伝子の上流領域の塩基配列の比較をおこなった。その結果、系統的に離れた種の幼生筋特異的アクチン遺伝子の間で保存された10bp前後の長さの配列が、各遺伝子の転写開始点から上流230bp以内の領域に見いだされた。2.ホヤ筋肉アクチン遺伝子の上流領域の機能解析:(1)2種類のホヤMolgula oculataとMolgula occultaの幼生筋アクチン遺伝子について、上流領域に大腸菌のβガラクトシダーゼ遺伝子lacZをつないだ融合遺伝子をユウレイボヤ卵に顕微注入し、上流領域の筋肉特異的転写調節における機能を解析した。これらの遺伝子の転写開始点の上流250bpまでの上流領域が筋肉特異的な遺伝子発現に十分であることが示された。(2)Molgula oculataの幼生筋アクチン遺伝子の転写調節領域の機能を、塩基配列を人工的に改変することにより調べた。(a)筋肉特異的遺伝子発現には、上記1で見いだされた配列を含む、-35bpから-250bpの間の領域が必要であること、(b)この領域は転写開始点に対して逆向きにしても筋肉特異的な活性を保持していること、が示された。3)ホヤと脊椎動物の間で保存された転写調節機構の解析:(1)ホヤの筋肉アクチン遺伝子の転写調節領域をlacZ遺伝子に連結した融合遺伝子をメダカ胚に導入し、レポーター遺伝子の発現の解析を進めている。(2)ナメクジウオとメダカの筋肉アクチンcDNAを単離し、遺伝子発現様式をin situハイブリダイゼーションにより調べた。これらのアクチン遺伝子の転写調節機構を調べるために、これらの遺伝子を含むゲノムDNAクローンの単離をおこなっている。現在までに、アクチン遺伝子を含むクローンがいくつか得られている。

1. Comparison of the base arrangement of the upper field of the muscle and the muscle: Comparison of the base arrangement of the upper field of the muscle and the muscle of the muscle and the muscle of the muscle. The results showed that the system was isolated from the young tendons of different species, and the length of each gene was preserved before and after 10bp. The beginning point of each gene was recorded in the upper 230bp region. 2. Functional analysis of upstream region of muscle-specific gene:(1) Functional analysis of upstream region of muscle-specific gene regulation of 2 species Molgula oculata and Molgula occulta. 250bp upstream from the start point of the gene sequence, and 250bp upstream from the start point of the gene sequence, and 250 bp upstream from the start point of the gene sequence. (2)Molgula oculata's young muscle cells are regulated by the function of the regulatory domain, the basic arrangement of artificial changes in the regulatory domain. (a)The muscle-specific gene was found in the sequence shown in Table 1 above, and the region between-35bp and-250bp was necessary.(b) The region was found in the sequence starting point, and the muscle-specific gene activity was maintained in the sequence. 3) The analysis of the mechanism regulating the preservation of vertebrate genes:(1) The analysis of the gene regulation domain of vertebrate genes: the linkage of fusion genes: the introduction and development of vertebrate genes. (2)The expression of the cDNA of the muscle in the brain is called "in situ" and "in situ". The gene regulatory mechanism of this gene is regulated by the gene regulatory mechanism. Now, if you want to know more, please contact us.

项目成果

日下部 岳広: "アクチンを通してみたホヤの進化と多様性" 遺伝. 50・12. 23-28 (1996)

Takehiro Kusakabe：“通过肌动蛋白观察海鞘的进化和多样性”遗传学50・12（1996）。

Isato Araki: "Predominant expression of a cytoskeletal actin gene in mesenchyme cells during embryogenesis of the ascidian Halocynthia roretzi" Development, Growth and Differentiation. 38. 401-411 (1996)

Isato Araki：“海鞘Halocynthia roretzi 胚胎发生过程中细胞骨架肌动蛋白基因在间充质细胞中的主要表达”发育、生长和分化。

Takehiro Kusakabe: "Mechanism of an evolutionary change in muscle cell differentiation in ascidians with different modes of development" Developmental Biology. 174. 379-392 (1996)

Takehiro Kusakabe：“具有不同发育模式的海鞘中肌肉细胞分化的进化变化机制”发育生物学。

Takehiro Kusakabe: "Evolution of chordate actin genes : evidence from genomic organization and amino acid sequences" Journal of Molecular Evolution. (印刷中). (1997)

Takehiro Kusakabe：“脊索动物肌动蛋白基因的进化：来自基因组组织和氨基酸的证据序列”《分子进化杂志》（出版中）。