嗅覚系における神経回路の発生機構の共培養法による解析

利用共培养方法分析嗅觉系统神经回路的发育机制

基本信息

批准号：
08780779
负责人：
玉田篤史
金额：
$ 0.64万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08780779/
关键词：
嗅上皮嗅細胞嗅神経表皮外胚葉嗅球共培養拡散性誘引因子

项目摘要

嗅細胞の誘導機構まず、神経系のマーカー分子に対する免疫組織染色により、生体内の発生過程では、E12からNCAM陽性かつGAP43陽性の嗅細胞が現れることが明らかになった。この結果に基づき、マーカーをまだ発現していないE11の嗅上皮予定領域の表皮外胚葉を単独で培養したところ、マーカーが発現するようなった。しかし、もっと早いE10の表皮を単独で培養しても、マーカーがほとんど発現しなかった。このことから、嗅上皮への分化の方向性はE10からE11の間に決まることが示唆された。さらに、E10の表皮を表皮の内側に存在する間葉組織および終脳の組織片と共培養した結果、表皮の多くの細胞はマーカーを発現するようになった。このことは、表皮から嗅上皮への分化に間葉組織及び終脳が役割を果たすことを示唆する。2 嗅細胞の軸策ガイド機構嗅神経が終脳の嗅球から拡散性誘引因子によって嗅球にガイドされる可能性を嗅上皮と嗅球のコラーゲンゲル内での共培養法により調べた。その結果、嗅神経の伸長は嗅上皮単独培養の場合と嗅上皮と嗅球の共培養の場合とで差が認められなかった。これに対し、嗅上皮を嗅球の組織を接触させて培養した場合には、嗅上皮から伸びた嗅神経が嗅球内に侵入する様子が観察された。これらの結果は嗅神経は嗅球からの拡散性分子ではなく、伸長経路での接触依存性の細胞間相互作用によって嗅球まで誘導される可能性を支持する。3 嗅神経投射の嗅球の分化への関与上に挙げたように、嗅上皮と嗅球の共培養系において嗅神経の嗅球への投射を培養下で再現できたので、現在、この実験系で、嗅神経の嗅球予定領域への神経支配が嗅球を誘導するかどうか調べている。そのために、嗅球の分化のマーカーとなるR4B12分子(吉原、川崎、玉田ら、論文投稿中)の生体内および培養系での発現を調べている。

嗅觉细胞的诱导机制首先，神经系统中标记分子的免疫组织化学染色表明，NCAM阳性和GAP43阳性嗅觉细胞来自Vivo发育过程中E12。基于这些结果，当尚未表达的E11嗅觉上皮外皮外胚层被单独培养时，标志物被表达。但是，即使在较早的E10表皮被单独培养时，几乎没有表达标记。这表明分化向嗅觉上皮的方向是在E10和E11之间确定的。此外，E10的表皮与表皮内侧存在的间充质组织和尾脑组织片段共培养，表皮中的许多细胞开始表达标记。这表明间充质组织和尾脑在从表皮到嗅觉上皮的分化中起作用。 2。嗅觉细胞的轴突引导机制，嗅觉神经受到从端脑到嗅球的扩散吸引因子指导的可能性，是通过胶原凝胶中嗅觉上皮上皮和嗅球的共同培养研究的。结果，在嗅觉上皮的情况下，嗅觉神经的伸长和嗅觉上皮和嗅球共培养的情况没有差异。相反，当将嗅觉上皮与接触的嗅球组织培养时，观察到从嗅觉上皮细胞伸长的嗅觉神经会侵入嗅球。这些结果支持嗅觉神经不是与嗅球的扩散分子的可能性，而是通过伸长途径中的接触依赖性细胞 - 细胞相互作用来诱导嗅球。 3. As mentioned above, the involvement of olfactory nerve projections in olfactory bulb differentiation, projections of olfactory nerves to olfactory bulbs can be reproduced under culture in a co-culture system of olfactory epithelium and olfactory bulbs, and we are currently investigating whether innervation of the olfactory nerve to the expected region of olfactory bulbs induces olfactory bulbs.为此，我们研究了R4B12分子（Yoshiwara，Kawasaki，Tamada等人，在论文提交中）的表达，这是体内和培养系统中嗅球差异的标志。