オオムギ硝酸還元酵素アイソザイムの異なる機能発現制御機構の解明

阐明大麦硝酸还原酶同工酶的不同功能表达控制机制

• 批准号: 09760057
• 负责人: 末吉 邦
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Niigata University (1998)Kobe University (1997)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760057/
• 关键词: オオムギ; 硝酸還元酵素; アイソザイム; 遺伝子発現; 発現制御

「目的」オオムギには、活性に必要な電子供与体としてNADHのみを用いるNADH-NRと、NADHとNADPHの両方を用いるNAD(P)H-NRの2つのアイソザイムが存在する.しかし、硝酸同化における両者の機能的な差異は全く不明である.本研究では、硝酸イオン、代謝産物、光、ホルモンなどに対する両NRの機能発現応答の様式の違いを、転写レベル、タンパク質の発現レベルで詳細に解析することが目的である。「経過」前年度までに、硝酸イオンによるNRの発現誘導、同化窒素であるグルタミンやアスパラギンによる発現の抑制を調べ、両NR間で差異はないことを報告した.今年度は、オオムギ幼植物を明暗周期の条件下におき、NR活性およびNRタンパク質の変動を調べた.「結果と考察」オオムギを明暗周期の下で生育させ、明期および暗期開始後30分の植物より採取した葉をそれぞれ明処理葉および暗処理葉とした.暗処理葉から得た粗抽出液のNADH NRはMg^<2+>存在下で不活性化された.イムノブロット解析では、不活性化に伴ってNRタンパク質の減少はみられなかった.また、植物を暗所から明所に戻すとNR活性は元のレベルまで戻った.従って、NADHNRは暗条件に応答して可逆的に不活性化されると結論づけた.NAD(P)HNR活性は、野生型オオムギ葉において微弱であったため同様の解析が困難であった.NAD(P)HNR活性が葉において高く発現している変異株の種子を入手したので、これを用いて今後同様の解析を行う.

"Objective": The electron donor, NADH donor, NADPH donor, NADPH The difference between the functions of nitric acid assimilation and nitric acid assimilation is unknown. The purpose of this study is to analyze in detail the functional development of NR in relation to nitric acid, metabolites, light and sulfur. The difference between NR and NO_3 was reported in the previous year. Under the condition of light and dark cycle, NR activity and NR quality of young plants are regulated. The results show that the light and dark periods of the plant are 30 minutes after the beginning of the light and dark periods. NADH NR in the crude extract of dark treated leaves was inactivated in the presence of Mg^<2+>. The analysis of the protein and the inactivation of the protein are accompanied by the reduction of the protein and the inactivation of the protein. The plant is dark, the plant is bright, the NR activity is active, the plant is active, and the NR activity is active. NAD(P) HNR activity is very weak in the wild type leaves, and it is difficult to analyze the same species.NAD(P) HNR activity is very high in the leaves, and it is difficult to analyze the same species in the seeds of different plants.

项目成果

Kuni Sueyoshi: "Effects of amides on the expression of NADH and NAD(P)H nitrate reductase genes in barley seedlings." Plant Nutrition for sustainable Food Production and Environment. 51-60 (1997)

Kuni Sueyoshi：“酰胺对大麦幼苗中 NADH 和 NAD(P)H 硝酸还原酶基因表达的影响。”

Kuni Sueyoshi: "Purification of inactivation facter of phosphorylated nitratereductase from leaves of Brassica campestris" Journal of Plant Physiology. 153. 74-78 (1998)

Kuni Sueyoshi：“从甘蓝叶中纯化磷酸化硝酸还原酶失活因子”植物生理学杂志。