MALDI-TOF/MS及びNMRによる蛍光標識糖鎖の構造解析

通过 MALDI-TOF/MS 和 NMR 进行荧光标记糖链的结构分析

• 批准号: 09760068
• 负责人: 吉田 滋樹
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760068/
• 关键词: 糖鎖; オリゴ糖; ポリアクリルアミド電気泳動; NMR; MALDI-TOF; MS

本研究は、糖鎖の分析法として開発された蛍光標識ポリアクリルアミド電気泳動法(PAGEFS)、レーザー脱離法飛行時間型質量分析法(MALDI-TOF/MS)及びNMRを用いて簡便に糖鎖構造を解析する方法の確立を目的としている。このうち昨年度は、(1)分取型電気泳動装置を用いて蛍光標識糖の調製する場合のスケールアップファクターの確立、(2)MALDI-TOF/MSでの蛍光標識糖の分析条件(特にマトリックス)の最適化、について検討を行ったが、本年度も昨年に続きTOF/MSでの分析条件の最適化を行うと共に、蛍光標識糖のNMRでの構造解析の最適化を行った。(1) MALDI-TOF/MSでの蛍光標識糖の分析条件の最適化分取用電気泳動装置を用いて調製した蛍光標識マルトオリゴ糖について、MALDI-TOF/MSの測定時におけるマトリクスの検討をVoyager^<TM>を用いて行った。昨年度マトリックスとして検討した1%2,5-dihydroxybenzoic acidの10%エタノール溶液の他に2,4,6-trihydroxyacetophenoneを用いたものについても検討した結果、どちらのマトリックスでもほぼ同様な分析データが得られた。また、FAB-MSでは分析が困難な酸性オリゴ糖についても、明瞭な分子イオンピークが得られた。(2) 調製した蛍光標識糖のNMRでの分析条件の最適化MALDI-TOF/MS同様、まず蛍光標識マルトオリゴ糖を用い、H-およびC-NMRでの分析を行った。蛍光標識糖としては、アミノピリジル化した各種オリゴ糖のNMRのデータが多く得られているが、本研究で用いた標識剤ANTSの場合も、NMRでのシグナルはアミノピリジル化したものとほぼ同様なものが得られた。従って、数多く報告されているアミノピリジル化したオリゴ糖の分析データを参考にすることでANTS化した物のシグナルの帰属が容易に行えることが明らかとなった。

The purpose of this study is to establish a simple and convenient method for the analysis of carbohydrate structure by using optical identification, electrokinetic electrophoresis (PAGEFS), time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF/MS) and NMR. This year,(1) the establishment of a separation type electrokinetic device for the use of optically labeled sugar modulation,(2) the optimization of analytical conditions for optically labeled sugar by MALDI-TOF/MS, the optimization of analytical conditions for optically labeled sugar by MALDI-TOF/MS, the optimization of analytical conditions for optically labeled sugar by MALDI-TOF/MS, and the optimization of structural analysis for optically labeled sugar by NMR. (1)MALDI-TOF/MS optical identification of sugar analysis conditions for the optimization of separation of electrophoresis device in the use of medium modulation, optical identification of sugar, MALDI-TOF/MS determination time in the use of medium <TM>detection Last year, the results of the analysis of 1% 2,5-dihydroxybenzoic acid and 10% 2,4,6-trihydroxyacetophenone solution were obtained. FAB-MS analysis is difficult, and it is difficult to analyze acid and sugar. (2)Optimization of analytical conditions for modulated optical identification of sugar by MALDI-TOF/MS, optical identification of sugar by H-NMR and C-NMR In this study, we used the method of NMR to identify the sugar in the sample. For example, if you want to use the software, you can use the software.