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単一副腎髄質細胞におけるイノシトール3燐酸によるCa放出機構と分泌反応の解析

三磷酸肌醇诱导单个肾上腺髓质细胞Ca释放机制及分泌反应分析

基本信息

批准号：
09760261
负责人：
太田利男
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760261/
关键词：
ムスカリン受容体カフェイン細胞内Caストア Ca依存性Kチャネルイノシトール3燐酸バッチクランプ fura-2 副腎クロム親和性細胞細胞内カルシウムストアカルシウム依存性カリウムチャネルパッチクランプ細胞内カルシウム濃度副腎髄質細胞

项目摘要

昨年度はムスカリン受容体刺激はイノシトール3燐酸(IP3)による細胞内ストアからのCa^<2+>放出により,細胞膜イオンチャネルの活性化を起こすことを明らかにした。本年度はカフェイン感受性ストアの機能とIP3受容体との関係について、カフェインによる膜電流と細胞内Ca^<2+>濃度([Ca^<2+>]i)変化を同時測定することにより検討した。また,単一細胞からのカテコールアミン放出測定のため炭素電極を用いたアンペロメトリー法を確立し、ムスカリンとカフェインによる分泌反応の性質を調べた。(1)保持電位-60mV以上では,カフェインにより一過性の[Ca^<2+>]i増加反応に伴い,外向き電流が発生した。(2)Ca依存性Kチャネル遮断薬のアパミン及びカリプドトキシンはカフェインによる[Ca^<2+>]i増加に影響を与えず,外向き電流を抑制した。(3)カフェインによる電流及び[Ca^<2+>]n増加反応は細胞内ストアCaポンプ阻害薬のシクロピアゾン酸により可逆的に抑制された。(4)カフェインによる[Ca^<2+>]i増加反応は、細胞内へのIP3適用により消失したが、内因性リアノジン受容体アゴニストであるサイクリックADPリボース適用では影響を受けなかった。(5)同一細胞でムスカリンとカフェインによる[Ca^<2+>]i増加と外向き電流反応の大きさを比較すると、約半数の細胞ではカフェインによる[Ca^<2+>]i増加はムスカリンに比べて小さいか,同程度であるにも拘わらず,ムスカリン反応より大きな外向き電流を誘発した。(5)膜電位固定した単一細胞において、カフェイン,ムスカリン共に[Ca^<2+>]i増加反応に伴い、カテコールアミン分泌を誘発した。これらの成績から、モルモット副腎髄質細胞において,カフェインはムスカリン(IP3)と同じ細胞内ストアからCa^<2+>を放出させることにより、ムスカリン同様に細胞膜のCa^<2+>依存性K^+チャネルを活性化させると共に、カテコールアミン放出を引き起こすが、カフェインによる細胞内ストアからのCa^<2+>放出部位はIP3とは異る可能性が示され、副腎髄質細胞におけるカテコールアミン分泌並びにイオンチャネル制御様式がIP3とカフェインで異なることが示唆された。

In the past year, the receptor stimulated the release of Ca^<2+> from the cell membrane, and the activation of the cell membrane was initiated. This year, the relationship between the receptor function and IP3 receptor was measured simultaneously with the membrane current and intracellular Ca^<2+> concentration ([Ca^<2+>]i). In addition, the properties of the secretory reaction were modulated by the method of determining the emission of carbon electrode in a single cell. (1)Hold potential above-60mV, transient [Ca^<2+>]i increases, reverse current occurs. (2)Ca Dependence K ~(2+) on the effect of increasing [Ca ~(2+)]i on the occurrence and suppression of outward current (3)The current and [Ca^<2+>]n increase in intracellular Ca ~(2 +) inhibition. (4)[Ca^<2+>]i increases in response, intracellular IP3 application, disappearance, endogenous receptor loss, and application. (5)In the same cell,[Ca^<2+>]i increased and outward current was induced. About half of the cells had [Ca^<2+>]i increased and outward current was induced. (5)The membrane potential is fixed in a cell, and [Ca^<2+>]i is increased in response to the increase in the secretion of [Ca^<2+>]. The results of this study include: (1) Ca^<2+>-dependent K^<2+>-dependent activation of cell membrane in pararenal cytoplasmic cells (IP3);(2) Ca^<2+>-dependent activation of cell membrane in pararenal cytoplasmic cells (IP3); and (3) Ca^<2+>-dependent activation of cell membrane in pararenal cytoplasmic cells (IP3). The intracellular Ca^<2+> release site is IP3, and the possibility of Ca^<2+> secretion from pararenal cytoplasmic cells is IP3. The Ca ^<2 +> release site is IP3.