単一副腎髄質細胞におけるイノシトール3燐酸によるCa放出機構と分泌反応の解析

三磷酸肌醇诱导单个肾上腺髓质细胞Ca释放机制及分泌反应分析

• 批准号: 09760261
• 负责人: 太田 利男
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09760261/
• 关键词: ムスカリン受容体; カフェイン; 細胞内Caストア; Ca依存性Kチャネル; イノシトール3燐酸; バッチクランプ; fura-2; 副腎クロム親和性細胞; 細胞内カルシウムストア; カルシウム依存性カリウムチャネル; パッチクランプ; 細胞内カルシウム濃度; 副腎髄質細胞

昨年度はムスカリン受容体刺激はイノシトール3燐酸(IP3)による細胞内ストアからのCa^<2+>放出により,細胞膜イオンチャネルの活性化を起こすことを明らかにした。本年度はカフェイン感受性ストアの機能とIP3受容体との関係について、カフェインによる膜電流と細胞内Ca^<2+>濃度([Ca^<2+>]i)変化を同時測定することにより検討した。また,単一細胞からのカテコールアミン放出測定のため炭素電極を用いたアンペロメトリー法を確立し、ムスカリンとカフェインによる分泌反応の性質を調べた。(1)保持電位-60mV以上では,カフェインにより一過性の[Ca^<2+>]i増加反応に伴い,外向き電流が発生した。(2)Ca依存性Kチャネル遮断薬のアパミン及びカリプドトキシンはカフェインによる[Ca^<2+>]i増加に影響を与えず,外向き電流を抑制した。(3)カフェインによる電流及び[Ca^<2+>]n増加反応は細胞内ストアCaポンプ阻害薬のシクロピアゾン酸により可逆的に抑制された。(4)カフェインによる[Ca^<2+>]i増加反応は、細胞内へのIP3適用により消失したが、内因性リアノジン受容体アゴニストであるサイクリックADPリボース適用では影響を受けなかった。(5)同一細胞でムスカリンとカフェインによる[Ca^<2+>]i増加と外向き電流反応の大きさを比較すると、約半数の細胞ではカフェインによる[Ca^<2+>]i増加はムスカリンに比べて小さいか,同程度であるにも拘わらず,ムスカリン反応より大きな外向き電流を誘発した。(5)膜電位固定した単一細胞において、カフェイン,ムスカリン共に[Ca^<2+>]i増加反応に伴い、カテコールアミン分泌を誘発した。これらの成績から、モルモット副腎髄質細胞において,カフェインはムスカリン(IP3)と同じ細胞内ストアからCa^<2+>を放出させることにより、ムスカリン同様に細胞膜のCa^<2+>依存性K^+チャネルを活性化させると共に、カテコールアミン放出を引き起こすが、カフェインによる細胞内ストアからのCa^<2+>放出部位はIP3とは異る可能性が示され、副腎髄質細胞におけるカテコールアミン分泌並びにイオンチャネル制御様式がIP3とカフェインで異なることが示唆された。

Yesterday's annual は ム ス カ リ ン under let body は イ ノ シ ト ー ル 3 燐 acid (IP3) に よ る intracellular ス ト ア か ら の Ca ^ 2 + > < release に よ り, cell membrane イ オ ン チ ャ ネ ル の activeness を up こ す こ と を Ming ら か に し た. This year's は カ フ ェ イ ン susceptibility ス ト ア の function と IP3 by let body と の masato is に つ い て, カ フ ェ イ ン に よ る と intracellular Ca membrane current ^ > < 2 + concentration ([Ca ^ > < 2 +] I) - the を simultaneous determination す る こ と に よ り beg し 検 た. ま た 単 a cell か ら の カ テ コ ー ル ア ミ ン release determination の た め carbon electrode を with い た ア ン ペ ロ メ ト リ ー を established し, ム ス カ リ ン と カ フ ェ イ ン に よ る secrete the 応 の nature を adjustable べ た. (1) keep potential - more than 60 mv で は, カ フ ェ イ ン に よ り transient の [Ca ^ > < 2 +] I raised with the 応 に companion い, outgoing き current が 発 raw し た. (2) Ca dependency K チ ャ ネ ル interrupt 薬 の ア パ ミ ン and び カ リ プ ド ト キ シ ン は カ フ ェ イ ン に よ る [Ca ^ > < 2 +] I raised with に influence を and え ず, outgoing き current を inhibit し た. (3) カ フ ェ イ ン に よ る current and び [Ca ^ 2 + < >] n rights and against 応 は intracellular ス ト ア Ca ポ ン プ resistance against 薬 の シ ク ロ ピ ア ゾ ン acid に よ り reversible inhibition に さ れ た. (4) カ フ ェ イ ン に よ る [Ca ^ > < 2 +] I raised with the 応 は, intracellular へ の IP3 applicable に よ り disappear し た が, endogenous リ ア ノ ジ ン by let body ア ゴ ニ ス ト で あ る サ イ ク リ ッ ク ADP リ ボ ー ス applicable で は を by け な か っ た. (5) the same cell で ム ス カ リ ン と カ フ ェ イ ン に よ る [Ca ^ > < 2 +] I raised と outgoing requirement by き current anti 応 の big き さ を compare す る と, about half of の cell で は カ フ ェ イ ン に よ る [Ca ^ > < 2 +] I raised with は ム ス カ リ ン に than べ て small さ い か, with degree で あ る に も detained わ ら ず, ム ス カ リ ン anti 応 よ り き Youdaoplaceholder0 outward な current を induces た. (5) the membrane potential of fixed し た 単 a cell に お い て, カ フ ェ イ ン, ム ス カ リ ン altogether に [Ca ^ > < 2 +] I raised with the 応 に い, カ テ コ ー ル ア ミ ン secretion を 発 lure し た. こ れ ら の grades か ら, モ ル モ ッ ト adrenal marrow stromal cells に お い て, カ フ ェ イ ン は ム ス カ リ ン (IP3) と じ intracellular ス ト ア か ら Ca ^ 2 + < > を release さ せ る こ と に よ り, ム ス カ リ ン with others に membrane の Ca ^ ^ 2 + > < dependence K + チ ャ ネ ル を activeness さ せ る と に, カ テ コ ー ル ア ミ ン put Out を lead き up こ す が, カ フ ェ イ ン に よ る intracellular ス ト ア か ら の Ca ^ < 2 + > release part は IP3 と は different possibility る が shown さ れ, adrenal gland, marrow stromal cells に お け る カ テ コ ー ル ア ミ ン secretion and び に イ オ ン チ ャ ネ ル suppression others type が IP3 と カ フ ェ イ ン で different な る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Ohta Toshio: "Adrenal Paraneuron" Hokkaido University Press, 326 (1998)

大田俊夫：《肾上腺旁神经元》北海道大学出版社，326（1998）

Ohta Toshio: "Ca^<2+>-dependent K^+ currents induced by muscarinic receptor activation in guinea pig adrenal chromaffin cells." Journal of Neurochemistry. 70. 1280-1288 (1998)

Ohta Toshio：“豚鼠肾上腺嗜铬细胞中毒蕈碱受体激活诱导的Ca ^ 2 依赖性K ^ 电流。”

Sugawara Takeshi: "Inhibitory effects of tacrine and physostigmine on catecholamine secretion and membrane currents in guinea-pig adrenal chromaffin cells" Fundamental Clinical Pharmacology. 12. 279-285 (1998)

菅原武：“他克林和毒扁豆碱对豚鼠肾上腺嗜铬细胞儿茶酚胺分泌和膜电流的抑制作用”基础临床药理学。

Kitamura Naoki: "Calcium channel current facilitation in porcine adrenal chromaffin cells" Ptlugers Arch. 435. 781-788 (1998)

Kitamura Naoki：“猪肾上腺嗜铬细胞中的钙通道电流促进”Ptlugers Arch。

Ito Shigeo: "Characterization of 5-HT-containing chemoreceptor cells of the chicken aortic body" Journal of Physiology. 515. 49-59 (1999)

Ito Shigeo：“鸡主动脉体含 5-HT 化学感受器细胞的表征”生理学杂志。