消化管壁内神経細胞膜におけるイオンチャネルの性質と制御機構の解明

阐明胃肠壁神经细胞膜离子通道的特性和控制机制

• 批准号: 05760214
• 负责人: 太田 利男
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760214/
• 关键词: 壁内神経細胞; パッチクランプ法; イオンチャネル; ニコチン受容体; ムスカリン受容体; VIP放出; 細胞内Ca^<2+>動態

本研究では内臓平滑筋を支配している壁内神経細胞にイオンチャネル活性を調べると共に、抑制性神経ペプチドのvasoactive intestinal peptide(VIP)含有神経に対するコリン作動性の制御機構を検討した。1.単離ラット小腸壁内神経細胞の膜電流をホールセルパッチクランプ法により測定した。保持電位-60mVからの脱分極刺激により、テトロドトキシンとテトラエチルアンモニウムによって抑制される電流反応が生じた。このことから、壁内神経細胞膜には電位依存性Na^+及びK^+チャネルが存在することが示された。2.アセチルコリン(ACh)は電流ノイズを伴った内向き電流を発生させ、これはヘキサメトニウム(C6)及びアトロピンにより抑制された。3.壁内神経細胞内のCa^<2+>濃度([Ca^<2+>]i)をfura-2法により測定した。AChは著明な[Ca^<2+>]iの上昇を引き起こした。[Ca^<2+>]i増加反応の外液Ca^<2+>依存性を調べた結果、ニコチン受容体を介する反応は細胞外からのCa^<2+>流入より生じるが、ムスカリン受容体では細胞内貯蔵部位からのCa^<2+>放出も引き起こすことが明らかになった。4.壁内神経叢を含む摘出標本からのVIP放出を、ラジオイムノアッセイ法により測定した。高濃度K^+やNA^+チャネル活性化のベラトリジンは有意なVIP放出を引き起こした。5.AChは濃度依存性にVIP放出を引き起こし、この作用はC6で僅かに抑制され、アトロピンで完全に消失した。6.以上の成績から、壁内神経細胞の興奮性は膜電位依存性イオンチャネルにより制御されていると共に、ニコチンとムスカリン両受容体を介したコリン作動性制御も受けており、これら受容体は異なったCa^<2+>動員機構により機能していることが示唆された。また壁内神経内にあるVIP含有神経は主に、ムスカリン受容体を介したコリン作動性入力を受けていることが示された。今後は、VIP含有神経を同定し、この細胞におけるイオンチャネル活性、細胞内Ca^<2+>動態について調べて行きたいと思っている。

In this study, the internal smooth tendons dominate the growth of the cells in the wall, the activity of the cells, the activity of the inhibitive agents, the vasoactive intestinal peptide (VIP), and the control mechanism of the action system. 1. In the cell wall of the cell, the membrane current is measured by the method of cell current measurement. Maintain the potential-the 60mV voltage is very high. It stimulates the noise level and stimulates the flow of electricity. The cell membrane dependence of Na ^ + and K ^ + in the wall is sensitive to the concentration of Na ^ and K ^. two。 The inward current generator (ACh) is accompanied by the inward current generator (C6) and the inward current generator (C6). 3. The intracellular Ca ^ & lt;2+> concentration ([Ca ^ & lt;2+>] I) was measured by fura- 2 method. ACh noted that there was an introduction to [Ca ^ & lt;2+>] I. [CA ^ & lt;2+>] I add the results of the extracellular Ca ^ & lt;2+> dependence test, the introduction of extracellular Ca ^ & lt;2+> into the recipient, the release of the extracellular Ca ^ & lt;2+> into the recipient cell, the release of the extracellular Ca ^ & lt;2+>. 4. In the wall, the god contains the extraction of the tag, the release of the VIP, and the determination of the target. High temperature K ^ + Na ^ + lead to activating, intentional VIP release, lead up. 5.ACh is dependent on the degree of VIP release, the effect is C6, the inhibition, the complete disappearance of the virus. 6. The above system, in-wall system, cell-dependent membrane system, capacitor, receiver, operator, operator, operator, In the wall, the VIP contains the god, the acceptor, the receptive body, the sexual force, the body, the body and the body. In the future, VIP contains the activity of the same gene, the activity of the cell, the activity of the intracellular Ca ^ & lt;2+>, the action of the cell, the action of the cell, and the activity of the cell.

项目成果

Kimura H.: "Vasoactive intestinal peptide released by acetylcholine in the dog ileum." Journal of Autonomic Nervous System. (in press). (1994)

Kimura H.：“狗回肠中乙酰胆碱释放的血管活性肠肽。”

Kiso T.: "Characterization of vasoactive intestinal peptide receptors in canine liver membrane." Biochemical Pharmacology. 47. 241-245 (1994)

Kiso T.：“犬肝膜中血管活性肠肽受体的表征。”