原発性胆汁性肝硬変の肝組織内における疾患特異的抗原成分の検出の試み

尝试检测原发性胆汁性肝硬化肝组织中的疾病特异性抗原成分

• 批准号: 09770117
• 负责人: 原田 憲一
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770117/
• 关键词: 原発性胆汁性肝硬変; 疾患特異的抗原; Differential Display; 胆管; ピルビン酸脱水素酵素; 交差反応

原発性胆汁性肝硬変(PBC)は、自己免疫機序による肝内小葉間胆管の進行性の破壊と消失及び血清学的に自己抗体であるミトコンドリア抗体(AMA)の出現を特徴とする。まず、胆管消失の機序として、主にFas-Fasリガンドを介したアポトーシスが胆管消失の重要な因子であることを指摘し、欧文雑誌Hepatologyに発表した。また、AMAの対応抗原であるミトコンドリア内膜に存在するピルビン酸脱水素のE2成分(PDC-E2)を免疫組織化学的及び分子生物学的に検討したところ、PBCの胆管上皮にPDC-E2蛋白の発現亢進があるが、PDC-E2mRNAの発現亢進はみられないことから、PDC-E2蛋白と交差反応性を示す抗原成分が存在する可能性を指摘し、欧文雑誌Hepatologyに発表した。次に、このPDC-E2と交差反応性を示す抗原成分がPBCの病因になっているものと推測され、PBCの胆管特異的かつPDC-E2と交差反応性を示す新たな抗原の検出を試みた。PBC症例7例、対象肝3例の胆管上皮細胞の単離、mRNAの抽出、次いで逆転写反応よりcDNAサンプルを得た。そして、これらのサンプルを用いてDifferential Display法によりPBC特異的なmRNAシークエンスを検出しようと試みたが、現在までのところ、PBCの胆管細胞に特異的と考えられるmRNAは検出できない。原因として、胆管細胞の抽出に問題があり、非胆管細胞以外の細胞も混雑していたためmRNAの差異として検出できなかったと推測される。従って、新たな胆管細胞抽出法として、組織切片上で直接的に細胞を収集できるマイクロダイセクションシステムを用いて再検討をしているところである。

Original 発 sexual biliary cirrhosis - (PBC) は, their immune machine sequence に よ る intrahepatic interlobular bile duct の progressive の broken 壊 と disappear and び serological に their antibody で あ る ミ ト コ ン ド リ ア antibody (AMA) appear の を 徴 と す る. ま ず, bile duct disappear の machine sequence と し て, main に Fas - Fas リ ガ ン ド を interface し た ア ポ ト ー シ ス が bile duct disappear の important factor な で あ る こ と を blame し, Owen 雑 tzu Hepatology に 発 table し た. ま た, AMA の 応 seaborne antigen で あ る ミ ト コ ン ド リ ア lining に exist す る ピ ル ビ ン acid dehydration の E2 ingredients (PDC - E2) を immunohistochemical and molecular biology び に beg し 検 た と こ ろ, PBC の bile duct epithelium に PDC - E2 protein の 発 now hyperthyroidism が あ る が, PDC E2mRNA の 発 now hyperthyroidism は み ら れ な い こ と か ら, PDC - E2 protein と a job against 応 を す antigen composition が exist in す る possibility を blame し, Owen 雑 tzu Hepatology に 発 table し た. に, こ の PDC - E2 と job against 応 sex を す antigen composition in が PBC の causes に な っ て い る も の と speculation さ れ, PBC の bile duct specific か つ PDC - E2 と job against 応 sex を shown す new た な antigen の 検 try out を み た. In 7 cases of PBC and 3 cases of liver, <s:1> bile duct epithelial cells <s:1> 単 were isolated, mRNA <s:1> was extracted, and the <s:1> で で was reversed 転 to write the reverse 応よ <s:1> cDNA. Youdaoplaceholder4 <s:1> プ を を を を を を を を を を た た was obtained as た. そ し て, こ れ ら の サ ン プ ル を with い て Differential Display method に よ り PBC specific な mRNA シ ー ク エ ン ス を 検 out し よ う と try み た が, now ま で の と こ ろ, PBC の bile duct cells に specific と exam え ら れ る mRNA は 検 out で き な い. Pump, bile duct cells の reason と し て に problem が あ り, the bile duct cells outside の も 雑 し て い た た め mRNA の differences と し て 検 out で き な か っ た と speculation さ れ る. 従 っ て, new た な bile duct cell extraction method と し て, biopsy で に cells directly を 収 set で き る マ イ ク ロ ダ イ セ ク シ ョ ン シ ス テ ム を with い て again beg を 検 し て い る と こ ろ で あ る.

项目成果

Kenichi Harada: "In situ nucleic acid hybridization of pyruvate dehydrogenase complex-E2 in Primarybiliary cirrhosis:PDC-E2 mRNA is expressed in Hepatocytes but not inbiliary epithelium" Hepatology. 25・1. 27-32 (1997)

Kenichi Harada：“原发性胆汁性肝硬化中丙酮酸脱氢酶复合物-E2 的原位核酸杂交：PDC-E2 mRNA 在肝细胞中表达，但不在胆汁上皮中表达”《肝病学》25・1（1997 年）。

Kenichi Harada: "Enhanced apoptosis relates to bile duct loss in primary biliary cirrhosis." Hepatology. 26・6. 1399-1405 (1997)

Kenichi Harada：“细胞凋亡增强与原发性胆汁性肝硬化中的胆管损失有关。”26・6（1997）。

Kenichi Harada: "In situ nucleicacid hybridization of pyruvate dehydrogenase complex-E2 in primary biliary cirrhosis : Pyruvate dehydrogenase complex-E2 mRNA isex pressed in hepatocytes but not biliary epithelium." Hepatology. 25・1. 27-32 (1997)

Kenichi Harada：“原发性胆汁性肝硬化中丙酮酸脱氢酶复合物-E2 的原位核酸杂交：丙酮酸脱氢酶复合物-E2 mRNA 在肝细胞中表达，但在胆汁上皮中不表达”27·1。